实验动物的心得体会及感悟 动物实验学心得体会(9篇)
体会是指将学习的东西运用到实践中去,通过实践反思学习内容并记录下来的文字,近似于经验总结。我们如何才能写得一篇优质的心得体会呢?以下我给大家整理了一些优质的心得体会范文,希望对大家能够有所帮助。
最新实验动物的心得体会及感悟一
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(c55h72o5n4mg)和叶绿素b(c55h70o6n4mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素(c40h56)是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。β—具有维生素a的生理活性,其结构是两分子维生素a在链端失去两分子水结合而成。生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素a。目前,β—体可作为维生素a使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素(c40h56o2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。 由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
1.1 仪器与试剂
仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、uv-240
紫外分光光度计
试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无
水硫酸钠、硅胶g、中性氧化铝(150目~160目)
1.2 提取与分离
1.2.1 浸泡法提取色素
在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 ml3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转
移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。洗涤时要轻轻旋荡,以防乳化。弃去水乙醇层,石油醚层用无水硫酸钠干燥,干燥后滤入小圆底烧瓶,在水浴上蒸发浓缩至大约l m l。
1.2.2 薄层层析
取四块显微载玻片,硅胶g经0.5%羧甲基纤维素钠调制后制板,在室温下晾干后在110°c活化1h。选取效果最好的一块进行点样。
展开剂:(1)石油醚—丙酮=8:2(体积比)
(2)石油醚—乙酸乙酯=6:4(体积比)
取活化后的层析板,点样,放入预先选定展开剂的广口瓶。瓶的内壁贴一张高5cm,绕周长4/5的滤纸,下部浸入展开剂中,盖上瓶盖。待展开剂上升至规定高度时,取出层析板,晾干,做出标记。
分别用两种展开剂展开,比较不同展开剂的展开效果。观察斑点在板上的位置并排列出胡萝卜素、叶绿素和叶黄素的rf值的大小。注意更换展开剂时,需干燥层析瓶,不允许前一种展开剂带入后一系统。
1.2.3 柱层析
取少量脱脂棉在小烧杯中用石油醚浸润后,挤压除去气泡,放在层析柱底部。在层析柱中加15cm石油醚。加入中性氧化铝8克,打开柱下活塞,保持石油醚高度不变,氧化铝在柱子中堆积。装完后,打开下端活塞,放出溶剂,直到氧化铝表面剩下1—2mm高为止(不能使氧化铝表面露出液面)。
将浓缩液用滴管加到柱顶部,打开下端活塞,让液面下降到柱面以下1mm,关闭活塞,加数滴石油醚,打开活塞,使液面下降,几次反复,使色素全部进入柱体。
在柱顶加1.5cm洗脱剂——9:1(体积比)石油醚—丙酮。打开活塞,用锥形瓶收集。当第一个有色成分即将滴出时,取另一锥形瓶收集,得橙黄色溶液,即胡萝卜素。
2.1提取
由于甲醇与乙醇的极性相近,但是乙醇易得、无毒,所以用3:2的石油醚一乙醇通过浸泡的方法提取菠菜色素,而不是用石油醚—甲醇。
2.2分离
薄层层析
薄层层析又叫薄层色谱,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,属固—液吸附色谱,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点,可以用于少量样品(几到几微克,甚至0.01微克)的分离。实验中涉及的菠菜色素的比移值(rf)(薄层色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值)列表如下:
在一定的色谱条件下,特定化合物的rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的rf值鉴定化合物。
菠菜色素中各种色素的比移值rf大小为:胡萝b素 叶黄素叶绿素,按此顺序它们的非极性依次减弱。物质极性的判断为柱层析中洗脱剂的选择提供了参考价值。
柱层析
胡萝卜素极性最小,因此胡萝卜素的洗脱剂用极性较小的9:l的石油醚-丙酮溶剂效果较好。但要收集其他几种色素得换用其他的洗脱剂,因为色素的极性各不相同,且有一定差别。如用7:3石油醚-丙酮分离叶黄素.分离出胡萝卜素和叶
黄素后,可加大溶剂极性以较快速度洗脱叶绿素.用3:1:1的丁醇-乙醇-水洗
脱剂洗脱叶绿素。
采用浸泡法提取色素比抽滤法更好。在薄层层析时,用石油醚-丙酮=8:2时,能更明显的看到分层。在柱色谱洗脱剂的选择上,基于薄层分析的极性判断选择了石油醚-丙酮=9:1的溶剂作为洗脱剂,取得了非常好的效果。通过实验,进一步认识到洗脱剂在柱层析中的重要性。
最新实验动物的心得体会及感悟二
人的时间和精力是有限的,在有限的生命中,我们每天都面临着这样的选择:做什么和不做什么。
决心做一件事之前,一般要了解“为什么”和“是什么”,着手做的时候则关心“怎样做”,做过之后会反思“做得怎样”,大千世界,事及万物,莫不如此。
作为一名未来的管理者,erp沙盘模拟从理论上教给我管理的基本步骤和基本精神。我可以从中认知企业,并学会其战略管理,营销管理,生产管理,财务管理,人力资源管理,信息管理几大部门的构成及其企业在此应积极地协调部门之间的合作,更在此中提升自身的专业知识和技能,最终提高我的综合素质。而在此之中,又始终有一种信仰贯穿其中,那就是树立了共赢观念,以促进全局观念和团队合作意识,并且始终保持诚信,推进个性与职业的定位,最终感悟人生,思考两者的相通行。
首先,我们通过团队的组建,公选出了 ceo,再以ceo对每人性格的考虑来任命每人的职业,准备工作就此完毕,本公司正式注册运行。
我在本公司所担任的是财务助理。在此期间,我所做的工作主要是协助财务总监做好本公司的财务管理。包括负责日常的现金收付的记录,并且定期核查企业的经营状况,核算企业的经营成果,按时报送财务报表;对成本数据进行分类和分析;定期清查现金,盘点存货,确保帐实相符。
在起始年的一年里,在老师的带领下,我们基本了解到公司的运营步骤。而在此期间,老师所解说的规则,则是在学习中最至关重要的。年初,在ceo的带领下,我们根据市场预测表,以打广告的形式来争取订单并最终支付了1百万的广告费。在这一年中我们公司所拥有的三条生产线,两条手工生产线,一条半自动生产线,成功完成订单任务。通过财务的整理,我们公司在年终的结算中获得净利润2百万。
在所有公司的生产正常的注册运营后,起始年开了一个很好的头。
我们公司在ceo的带领下,开始独立经营。公司的营运过程中,我学会了在年初要进行最重要的订货会,而所要支付的广告费用是一个重要的决定,广告费得多少往往还会决定公司今年所能获得收益,更有可能是决定市场老大的最好帮手。在投资新生产线定位同时,我们又促进产品的研发投资。
我们公司所投入的广告费用是6百万,这使得我们拥有一定的优势。但是,在最终的订货会上,我们没有利用这一优势,因为没有按照运营流程来开始,在产品未研发出来时就下了此项订单,使我们公司的几百万广告费打了水漂。其次,在经营的过程中,我们在没有考虑到资金的预算方面投资了柔性生产线的生产,最终使公司的资金出现缺口。
一年的时间会很快,我们公司也在成长。这一年中,我们的失误很多,在下一年中,我们会重视公司的运营流程,坚决维护好规则,做好资金的预算,备战新一年的挑战。
本年度,我们公司吸取上一年的教训,认真分析市场的需求与变化,制定相对完善的市场计划。首先,我们支付了7百万的广告费,希望在新一年里占据广告优势。并且,积极在季度一开始促进产品的研发,适应市场对产品的需求。相对于竞争来说,本公司在这一年中的合作是一个大发展。我们在产品已经超出供给的情况下,向其他公司出售了价值10百万的成品。
然而,在这一年中,由于对市场的分析不到位,我们公司在资金与投资方面依然面临严重的问题。并且,在没有了解规则的情况下,盲目的投资却未能获得开拓新市场的资格最终使订货会中的优势又成为泡影。在进行市场分析中凭借自己的猜测与幻想放大了收益的概率、缩小了风险的发生指数,使得公司依然是负债累累。
公司的发展需要大家的协调与合作,每一个部门的职能不同,但是缺少每一个部门都不行。在这一年中,我们公司的主要问题是没有调好各个部门的本职工作,并且始终把市场是主要的公司运行的目的理念抛到脑后。在下年中,我们会把这个理念灌输其中。
第三年,公司的运营已经慢慢走入正常轨道。这一年中,随着市场的变化,考虑到所需时间的长短,预算中我们将相继投资is9000的认证资格,投入新产品的研究开发,并且开拓新市场。通过预算现金的数据,我们公司在这一年中的订货会上取得了很大的成功。并且,通过对比厂房利息与租金的差额,公司最终决定卖出厂房以支付租金的形式来运用它,从而促进现金使用的灵活性。
本年度中,公司出现的一个最大问题是在现金的支出与收入记录方面。作为会计的我与财务主管没有做好本职工作,致使公司的资产与负债无法等同。在核算的过程中,隐瞒了公司所富余的2百万现金,失去了诚信的原则,从而给下一年的生产与结算带来很大的障碍,也使公司在下一年的生产被迫拖延。而在这一过程中,公司的运营依然存在混乱,各司其职,这个词并没有很好的体现在公司的生产过程中。并且,部门与部门之间没有很好的协调度,这给公司的记录就带来一定的麻烦。
虽然,公司的账单出现严重问题。但是,财务总监的精神却是值得学习的。在公司的账面出现问题时,她始终坚持找出问题所源,一遍又一遍的找老师请求核算。所以,在下一年的生产中,公司应该致力于部门与部门之间的合作与协调,把公司作为一个整体,从而促进公司的运营效率。
经过上一年的教训,公司在ceo的带领下,认真履行企业的运营流程,按顺序执行公司运行的各项操作,公司的各项记录得以清晰地呈现出来,而我们也能够从中清楚地知道公司的发展情况,从而做好下一年的战略计划。而在这一年开始之前,在老师的要求下,首先作了一份现金预算表,对公司在这一年所要进行的投资、采购、生产与销售作了详尽的计算。而在具体的生产运营过程中,公司通过变卖生产线与向其他公司购买成品来促进现金运用的灵活性。
在这一年中,公司并没有任何大的失误,各团队的合作也有了很大的进步。但是,在做预算取得一定的成功的同时,我们却违背了预算的计划。因为在生产的过程中,轻易修改了预算所做的采购与投资计划,又进行了大量的采购。
虽然在最终的结算中,我们的现金并没有再发生紧缺的情况,反而给公司带来一定数量的库存,为下一年的生产提供了一定的成品,为交易节省了时间。但是,这依然是一种冒险主义。
总结这一年中我们公司所取得的成绩,经过三年的艰难时期,终于在第四年获得了净利润9百万。而在下一年的竞争中,我们会不断改善公司的相应政策,从而获取更大的利润。
四年的管理经验,可能使我们的管理经验今非昔比。如何有效利用资源,扩大市场份额,提升利润是我们最应该关注的。在第五年中,我们的预算表通过严密的思考与核算,基本定位公司今年的发展方向。
经营的过程是快乐的,在保证盈利的情况下,公司的干劲十足。而在这一过程中,公司依然存在小细节的问题,依然需要完善。小细节决定大事件,这也就需要公司各部门之间与ceo的默契。
公司在年终的结算中,获得净利润8百万,这也为下一年的发展奠定一个很好的基础。
两天的模拟学习,六年的管理经验,了解一个企业的成长过程,更体会到了管理的艰辛与艺术。
自主当家的第一年,几乎和收益沾不上边。经过一年的脑细胞的灭亡,渐渐意识到很多重要的感受,特别是从感性走向理性。三年的时间是一个很长的时间跨度,理性中的我们回过头审视那些战略,对市场和产品做的一次次分析,才明白企业经营中的利润来之不易。又一个三年开始了,而过去三年的管理经验已经使我们今非昔比,如何有效利用资源,扩大市场份额,提升利润早已经深刻铭记在我们的脑中。
管理是科学,管理更是艺术。我们已经走过了五年,拥有了很多深刻的体会。遗憾的是我们并没有完整的走过六年,始终有一种意犹未尽的感觉。但是,结束也意味着新的开始,在这一重要的过程中,我们有过多的教训与失败,也有最宝贵的收获。
erp,很好的管理老师。
最新实验动物的心得体会及感悟三
对某种教育现象实验后,要对整个实验过程进行全面总结,提出一个客观的、概括的、能反映全过程及其结果的书面材料,即谓教育实验报告。教育实验报告可分为三部分:①前言。②实验过程和结果。③讨论及结论。实验报告的基本结构:
(1)题目。应以简练、概括、明确的语句反映出教育的对象、领域、方法和问题,使读者一目了然,判断出有无阅读价值。
(2)单位、作者。应写明研究者的工作单位,或写明某某课题实验者或牵头人、组长、撰稿人,其他人员可写在报告的结尾处。以示对实验报告的负责,并便于读者与之联系。
(3)课题部分。是实验研究工作的出发点和实验报告的核心。课题的表述要具体、清楚,明确表示出作者的研究方向、目的,并说明课题来源、背景、针对性及解决该课题的实际意义的价值。
(4)实验方法。这是实验报告的主要内容之一,目的是使人了解研究结果是在什么条件下和情况中通过什么方法,根据什么事实得来的,从而判定实验研究的科学性和结果的真实性和可靠性,并可依此进行重复验证。关于实验方法主要应交代:①怎样选择被试,被试的条件、数量、取样方式,实验时间及研究结果的适应范围。②实验的组织类型(方法)及采取这种组织类型的依据。即:单组实验、等组实验还是轮组实验;采取这种实验类型的依据包括哪些方面,如考试成绩及评分标准;基础测定及测定内容等。③实验的具体步骤;对实验班进行实验处理的情况。④因果共变关系的验证(要注意原因变量一定要出现在结果变量之前,或两者同时出现,但不能产生于结果变量之后,否则先果后因,实验就不成立了)。这里,要对两个变量进行测定。测定方法也应交代清楚:是口头测定,书面测定还是操作测定;是个别测定还是集体测定;有无后效测定的时间等。因此,在实验前,就应对与效果变量测定内容相关的原因变量进行测定,以便与效果变量对比。只有经过这样的对比,才能发现共变关系。⑤对无关因子的控制情况。只有严格控制无关因子的作用,才可运用统计检验来消除偶然因子的作用。
(5)实验结果。实验结果中最重要的是提出数据和典型事例。数据要严格核实,要注意图表的正确格式。用统计检验来描述实验因子与实验结果之间的关系;典型事例能使人更好地理解实验结果,使实验更有说服力。
(6)分析与讨论。即运用教育教学理论来讨论和分析与实验结果有关的问题。其主要内容有:①由实验结果来回答篇首提出来的问题;②对实验结果进行理论上的分析与论证;③把实验结果与同类研究结果相比较,找出得失优差;④提出可供深入研究的问题及本实验存在的问题,使以后的研究方向更明确,少走弯路。
(7)结论。它是整个实验的一个总结,它直接来自实验的结果,并回答实验提出的问题。下结论语言要准确简明;推理要有严密的逻辑性。结论适用的范围应同取样的范围一致。
(8)附录和参考文献。附录是指内容太多、篇幅太长而不便于写入研究报告但又必须向读者交代的一些重要材料。如测试题、评分标准、原始数据、研究记录、统计检验等内容;参考文献是指在实验报告中参考和引用别人的材料和论述。应注明出处、作者、文献、标题、书名或刊名及出版时间。如引用未经编译的外文资料,用原文注解,以资查证。(龚婕)
最新实验动物的心得体会及感悟四
质粒dna的提取、纯化及检测
姓名:xxx学号:2011001400xx年级:20xx级生物基地班 实验日期:20xx年9月16日—30日组别:6组 同组者:xx
1、掌握碱变性提取法提取大肠杆菌中质粒dna的原理和方法。
2、学习并掌握凝胶电泳进行dna的分离纯化的实验原理。
3、学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。
4、学习并掌握凝胶中dna的分离纯化方法。
1、质粒dna的制备方法
质粒(plasmid)是独立存在于染色体外、能自主复制并能稳定遗传的一种环状双链dna分子,分布于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中,但在细菌细胞中含量最多。细菌质粒大小介于1~200kb之间,是应用最多的质粒类群,在细菌细胞内它们利用宿主细胞的复制机构合成质粒自身的dna。
质粒dna的制备包括3个步骤:①培养细菌,使质粒dna大量扩增;②收集和裂解细菌;③分离和纯化质粒dna。主要方法包括:碱裂解法:0。2molnaoh 1%sds;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;sds裂解法:10%sds,一般用于质粒大量提取。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒dna的用途进行选择。本实验选择碱裂解法提取质粒dna。
2、质粒dna的提取——碱变性提取法
在细菌细胞中,染色体dna和质粒dna均被释放出来,但是两者变性与复性所依赖的溶ph值不同。在ph值高达12。0的碱性溶液中,染色体dna的氢键断裂,双螺旋结构解开而变性;共价闭合环状质粒dna的大部分氢键断裂,但两条互补链不完全分离。因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。当用ph值4。6的kac(naac)高盐溶液调节碱性溶液至中性时,变性的质粒dna可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中;但染色体dna不能复性,而是与不稳定的大分子rna、蛋白质—sds复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心,与复性的溶于溶液的质粒dna分离。溶于上清液的质粒dna,可用无水乙醇和盐溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性质类似,乙醇沉淀
dna的同时,也伴随着rna沉淀,可利用rnasea将rna降解。质粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白,可通过酚/氯仿抽提除去,最后获得纯度较高的质粒dna。
3、凝胶电泳进行dna分离纯化
电泳(electrophoresis)是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极方向移动的现象。各种生物大分子在一定ph条件下,可以解离成带电荷的离子,在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质,它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中,其中的电离子会发生移动,移动的速度可因电离子的大小形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异,就可以区别各种大小不同的分子。因而,凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化dna的片段,是分子生物学的核心技术之一。
凝胶电泳技术操作简单而迅速,分辨率高,分辨范围广。此外,凝胶中dna的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭(ethidium bromide,eb)或sybr gold染色直接观察到,甚至含量少至20pg的双链dna在紫外激发下也能直接检测到。需要的话,这些分离的dna条带可以从凝胶中回收,用于各种各样目的的实验。
分子生物学中,常用的两种凝胶为琼脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝胶。这两种凝胶能灌制成各种形状、大小和孔径,也能以许多不同的构型和方位进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高,使用于较小分子核酸(5—500bp)的分离和蛋白质电泳。它的分辨率非常高,长度上相差1bp或质量上相差0。1%的dna都可以彼此分离,这也是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行dna序列分析的分子基础。虽然它能很快地进行电泳,并能容纳较大的dna上样量,但是与琼脂糖凝胶相比,在制备和操作上繁琐。琼脂糖是从海藻中提取的长链状多聚物,由β—d—吡喃半乳糖与3,6—脱水—l—吡喃半乳糖组成,相对分子质量为104—105。琼脂糖加热至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液体,浇在模版上冷却后形成凝胶,其凝固点为40—45℃。琼脂糖凝胶相对于聚丙烯酰胺凝胶分辨率低,但它的分离范围更大(50至百万bp),小片段dna(50—20000bp)最适合在恒定轻度和方向的电场中水平方向的琼脂糖凝胶内电泳分离。琼脂糖凝胶电泳易于操作,适用于核酸电泳,测定dna的相对分子质量,分离经限制酶水解的dna的片段,进一步纯化dna等。
琼脂糖凝胶电泳是一种常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而带有负电荷,在电场中向正极移动。dna在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率主要取决于6个因素:样品dna分子的大小、dna分子的构象、琼脂糖浓度、电泳所用电场、缓冲液和温度。
1、实验仪器
培养皿、接种环、三角瓶、酒精灯、恒温振荡培养箱、50ml离心管、1。5ml塑料离心管(eppendorf管)、高速离心机、漩涡振荡器、微量移液器、不同型号枪头、天平、制胶槽、梳子、电泳仪、吸管、量筒、微波炉、灭菌锅、恒温水浴锅、试剂瓶、卫生纸和记号笔、手套等。
2、实验试剂
lb培养基,抗生素ap(氨苄青霉素),溶液ⅰ,溶液ⅱ,溶液ⅲ,rnasea母液,te缓冲液,饱和酚,氯仿/异戊醇混合液,酚/氯仿/异戊醇(pci)混合液,预冷无水乙醇,tae电泳缓冲液(10×),上样缓冲液(6×),琼脂糖,溴化乙锭(eb),dna相对分子质量标准物dna marker λ/hind ⅲ,5mol/l ph 5。2的醋酸钠。
1、准备实验
配制lb液体培养基,分装到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配lb固体培养基;准备1000ul、200ul、10ul移液枪尖各一盒,1。5ml离心管若干于500ml三角瓶中,50ml离心管2个 ,将上述物品包好连同配好的培养基一同灭菌。
2、菌体培养
在含有ap的lb平板上挑取一环携带有质粒puc19的e。coli dh5单菌落,接种于20mllb液体培养基中进行37℃振荡过夜培养,培养基中加ap100ul
(100ug/ml),质粒puc19具有ap抗性基因,使得带有puc19的质粒得以生长。 过夜培养后菌体量大,杂质较多,然后用移液枪吸取过夜培养物2ml转接于50mllb液体培养基中,培养基中加入ap250ul,37℃振荡培养4—6h至对数生长期后期,生长速率快,代谢旺盛,酶系活跃,杂质少,适合提取质粒。
3、质粒提取
(1)称量空的50ml离心管的重量为14。331g,然后将三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒满,液面距管口约1cm,7000rpm离心5分钟后弃去上清液,收集菌体细胞。
(2)向离心管中悬滴加入5ml冰预冷的溶液ⅰ打散菌体洗涤,用漩涡振荡器使之充分悬浮后用枪尖吹吸混匀,同步骤(1)离心,弃去上清,将离心管倒置于吸水纸上,使上清液全部流尽干燥,然后称重得14。437g,则菌体质量为106mg。
(3)洗涤后每100mg菌体应加入冰预冷的溶液ⅰ1ml,106mg菌体按100mg菌体处理,加入溶液ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混匀,冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部;维持渗透压,防止细胞提前破裂,防止dna受机械剪切力作用而降解。edta是ca2 和mg2 等二价金属离子的螯合剂,可抑制dnase的活性,抑制微生物的生长。tris—cl溶液提供适当的ph。
(4) 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml(与溶液ⅰ对应),轻加轻摇,冰浴5min。溶液变清亮透明粘稠如蛋清状。溶液ⅱ中的naoh使细胞膜发生了从bilayer(双层膜)结构向micelle(微囊)结构的相变化导致细胞溶解。同时,强碱性使染色体dna、质粒dna和蛋白质变性;sds为下一步沉淀做铺垫。
(5)按比例加入冰预冷的溶液ⅲ1。5ml(与溶液ⅰ、ⅱ对应),轻加轻摇,冰浴10min。溶液出现白色絮状沉淀。沉淀为蛋白质sds复合物、细胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh,因为长时间的碱性条件会打断基因组dna,只要是50-100 kb大小的片断,就不能再被pds共沉淀。同时变性的质粒dna复性。反应形成的高盐环境进一步加速了沉淀。
(6)12000rpm离心15min,白色沉淀聚集在离心管一侧,用移液枪将上清液转移到另一洁净的离心管中。然后向上清液中加入1/10体积的3mnaac混匀,加入2倍体积的冰无水乙醇,混匀,—20℃下沉降30分钟。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对dna很安全,因此是理想的沉淀剂。 dna溶液是dna以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去dna周围的水分子,使dna失水而易于聚合。在ph为8左右的溶液中,dna分子是带负电荷的,加一定浓度的naac或nacl,易于互相聚合而形成dna钠盐沉淀。
(7) 以12000rpm离心15min,小心倒去上清液,得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇,轻轻地覆盖沉淀,不打散沉淀,洗涤一次。
(8)以12000rpm离心5min,离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。去掉上清液,将离心管上沉淀部位做好标记,将离心管倒置于吸水纸上,干燥5min。粗提取的质粒呈浅黄色,随着水分的减少质粒变为无色。所以为了完全溶解质粒,要在离心管上标记质粒所在位置。
(9)将dna沉淀溶于1mlte缓冲液中,移液枪吹吸助溶,然后将溶解液转移到一个eppendorf管中。te是ph缓冲液,为dna提供稳定的生理状态,呈弱碱性,有利于保护碱基对。同时含有edta是二价阳离子的螯合剂,抑制dna酶作用。
4、质粒纯化
(1)eppendorf管中加入rnase a(纯浓度>50ug/ml),37℃保温0。5—1h
(2)将上述的溶液平均分配到2个1。5ml的微量离心管中,每管0。5ml,分别加入与溶液等体积的(500ul)tris饱和苯酚溶液,振荡混匀,7000rpm,离心5min,上清液转移到一洁净的eppendorf管中。苯酚是经tris饱和后的,显黄色。苯
酚加入后,溶液分层,苯酚向下,下层呈浅黄色,上层溶液无色,在中间产生大量白色沉淀,此为变性后的蛋白质。
(3)加入等体积的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振荡混匀, 7000rpm,离心5min,上清液转移到到另一洁净的eppendorf管中。苯酚是强的蛋白变性剂,但是苯酚留在质粒溶液中会影响dna的酶切,它本身易被氧化,会损伤质粒。氯仿也是蛋白变性剂,但是比酚弱,且能溶解质粒中的脂类,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫,有利于分层更明显。此时溶液中已看不到明显的白色沉淀,但仍有蛋白质的存在。
(4)加入等体积的氯仿溶液,振荡混匀, 7000rpm,离心5min,上清液转移到一洁净的eppendorf管中,得上清液400ul。
(5)向上清液中加入1/10体积的naac混匀,再加入2倍体积的冰无水乙醇,混匀,—20℃下沉降30分钟。
(6)以12000rpm,离心15min,弃去上清液,得到dna沉淀,为白色。
(7)向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗涤。然后以12000rpm离心5min,离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。
(8)去掉上清液,将离心管倒置于吸水纸上,室温干燥。用50ulte溶解于1管中。
5、质粒检测
(1)称取0。4g的琼脂糖,置于一锥形瓶中,在三角瓶上标好液面位置,加入40ml的1×tae电泳缓冲液,再加入5—10ml重蒸水,以补充在溶胶过程中损失的水分。然后置微波炉加热至完全溶化,溶液透明。冷却至50℃左右,倒入制板槽制板。
(2)待胶凝固后,小心拔起梳子,使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入1×tae 电泳缓冲液,至液面覆盖过胶面2—3cm。取1μl加电泳载样液和3μl质粒样品于小纸片上,用移液枪混匀。
(3)电泳1h,观察溴酚兰的带(蓝色)的移动。
(4) 把胶槽取出,小心滑出胶块,放进eb溶液中进行染色,完全浸泡约5min。
(5)凝胶成像仪观察。
(1)滴加溶液ii时,要逐滴加入,且要轻加轻摇溶液使之混匀,整体动作要快,因为强碱在溶液中停留时间不能过长,否则会破坏质粒dna。
(2)加入溶液iii后,生成了大量的絮状沉淀,溶液iii中和强碱使质粒复性,不可剧烈震荡, 防止染色体dna断裂,应该上下颠倒离心管,使其混匀。
最新实验动物的心得体会及感悟五
本实例是要创建边框为1像素的表格。
1、生均一台多媒体电脑,组建内部局域网,并且接入国际互联网。
2、安装windows xp操作系统;建立iis服务器环境,支持asp。
3、安装网页三剑客(dreamweaver mx;flash mx;fireworks mx)等网页设计软件;
4、安装acdsee、photoshop等图形处理与制作软件;
5、其他一些动画与图形处理或制作软件。
创建边框为1像素的表格。
四、实验方法与步骤
1) 在文档中,单击表格“”按钮,在对话框中将“单元格间距”设置为“1”。
2) 选中插入的表格,将“背景颜色”设置为“黑色”(#0000000)。
3) 在表格中选中所有的单元格,在“属性”面版中将“背景颜色”设置为“白色”(#ffffff)。
4) 设置完毕,保存页面,按下“f12”键预览。
本实验主要通过整个表格和单元格颜色的差异来衬托出实验效果,间距的作用主要在于表现这种颜色差异。表格的背景颜色和单元格的背景颜色容易混淆,在实验中要认真判断,一旦操作错误则得不到实验的效果。“表格宽度”文本框右侧的表格的宽度单位,包括“像素”和“百分比”两种,容易混淆,要充分地理解这两种单位表示的意义才能正确地进行选择,否则就不能达到自己想要的效果,设置错误就会严重影响实验效果。
最新实验动物的心得体会及感悟六
1、学会如何使用显微镜观察细胞;
2、了解细胞的结构;
3、学会制作临时装片。
(实验材料可换)松针、动物血液、动物神经细胞永久装片
载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜(物镜5x、10x、40x)
1、制作松针的临时切片:
(1)取干净的载玻片一个平置于试验台上,用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。
(2)将土豆切成条状(截面约:0.5x0.5cm)取两条,将一根松针夹在两个土豆条之间,用刀片削成尽量薄的薄片,削时,手腕不动,靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片,置于载玻片的水滴上。
(3)从一侧轻轻盖上盖玻片,不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴,即完成临时切片的制作。
2、观察切片:
(1)取出显微镜,置于试验台上靠左的位置,打开光源。
(2) 将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上,调整载物台位置,使盖玻片对准光源。
(3)使用5x物镜观察切片,使松针切片在视野中心,换成10x物镜,观察松针叶面横切结构。
(4)换成40x物镜观察,注意细胞及细胞内物质结构,画图。
3、动物血液临时装片的制作及观察(除了不用切片,其他类似)
4、 动物神经细胞永久装片的观察。
1、松针的叶面结构是什么样的?
2、动物细胞的结构是什么样的?与植物细胞又什么不同?
3、显微镜的物镜倍数愈大,视野的亮度如何?物体的大小如何?
4、如何调节焦距?
5、如何才能使切片尽量的薄?切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。
最新实验动物的心得体会及感悟七
商学院经济与管理实验中心
实验报告
实验名称 erp沙盘综合实验
班级 学号 姓名 同组学生姓名 实验时间:年 月 日星期 日 得分: 批改时间: 日 实验教师(签名): 张敏
一、 实验目的
在我看来,erp沙盘模拟实验课程不同于一般的以理论和案例为主的管理课程,而是通过一种体验式的互动学习让学生认识到企业资源的有限性,从而理解一般企业的经营管理思想,领悟科学的管理规律,提升管理能力的一类实践课程。主要目的简单的阐述如下:
1) 掌握如何通过沙盘展示企业的各种资源,按照既定流程开展经营活动;
2) 通过沙盘展示并模拟企业经营过程,体会战略管理、营销管理、生产管理、财务管理、人力资源管理、信息化管理等管理理论在经营企业中的综合应用技巧;
3) 通过学习并模拟企业经营,有意识地培养学生的学习能力、沟通能力和团队合作能力。
二、 实验内容
根据老师对沙盘模拟的规则解释以及参照《沙盘规则》和《运营表》在一定市场环境下,以小组为单位设计企业经营的基本理念、基本思路和基本方法,制定企业发展战略和经营策略,通过沙盘模拟企业运营的主要业务及其业务流程。要求各小组在分工明确条件下将自己的企业连续经营五年后分析成果。
三、 实验步骤
1) 阅读《商业预测》、《沙盘规则》和《运营表》,对erp沙盘模拟初步了解。
2) 老师讲解操作规则,了解企业运营的基本步骤。
3) 在老师的带领和指导下完成初始年的生产运营。
4) 小组成员分工,明确职务和目标责任。我在小组中担任营销总监。
5) 生产总监总结上年运营情况,确定下年产量;采购总监制定原料需求计划;营销总监根据产量,分析市场,给出广告投放计划,经ceo研究修正后投放广告。
6) 开始新一年的运营。组织召开新年度规划会议,各部门总监制定出具体计划,包括新建生产新,研发新产品,开拓新市场以及贷款等各项计划,小组讨论协商,ceo作出最后决定。
7) 营销总监参加订货会带回订单。
8) 根据获得的订单,各部门总监各司其职,开始新一年的生产活动。
9) 小组成员协调合作,完成生产任务,按订单交货。
10) 当年生产任务完成后,财务总监盘点收支,填写财务报表。
11) ceo组织年度总结,分析企业运营环境和竞争对手发展情况。各总监总结当年工作并提出下一年的相关规划。
12) 在ceo领导下,小组成员通力合作,完成以后各年生产运营。
四、 实验结果
第五年杜邦分析结果
结果:虽然第五年的所有者权益没有增加很大,但是加上固定的生产线、厂房等加分,我们a组无疑是第一名!
五、 实验思考题(可选)
通过这两天在沙盘上的实际操作,我对企业的经营、整体运作以及财务管理等方面有了新的认识。首先,一个企业能够正常的运转是要以一个协作的团队为基础的,每个人都应当明确自己的职责,做到各司其职,互相配合。其次,作为ceo要积极听取大家的意见,协调各方意见做出决策,并团结团队成员。作为主管财务方面的人员,应当在经营初期做好财务准备,核对账面的实际情况,了解企业目前的财务状况,做好财务分析帮助总经理明确企业决策的可实施性。同时还应当把好财务关,哪些资金可以动,哪些资金不可以动应当做到心中有数,避免出现资金年转不开的重大失误。再次,应当做好充分的市场调查,明确市场的发展趋势,资金的流转畅通以及对原材料需求的准确预测才能保证企业正常的运转。
在第一年的试验中,我们很成功,我从中得到了很多经验。 在报价、选单部分,要注意综合当年产量、市场预测供求关系、本年度流动资金状况、投资预测、谍报信息(其他组信息)等因素,做出最后的报价表。如经营的第1、2年,各项工程、产品生产、各种投资共同进行,需要很多钱,此时就必要采用低价多单策略,尽快将占用的资金收回。若当年产量不高,可适当调高价格拿高利润订单。 在投资方面,要权衡投资和回报期做投资决策。p2-p3产品研发投资大,不能同时开展,在开发时要分析市场走势分期分别开发。市场开发和iso认证的投资金额并不大,但投资期长,并且一但有此方面的高利润订单却不能选择,利润方面的损失将会很大,临时投资也赶不上下订单。因此市场投入和iso认证的投资在第一年开始就要全面投资。关于生产线建设,由于市场一直处于供不应求的状态,多条全自动生产线全负荷生产是提高总体利润的最有效办法。但对于类似于p1产品在国际市场走势的特殊性,也要有一定的预测和准备。暂时留一条半自动的p1生产线也是不错的选择。
在第二年的试验中,虽然我们依然很努力、很团结、很积极,但我们并不是很成功。我个人认为主要原因是决策方面没有突破。经过第一年的实验,大家都采用了多条全自动生产线 全面市场开发 两个iso认证投资的模式。此时想要更突出就必须有更大胆的作为。如卖掉厂房,贷高额贷款,抢先开发p4或多建全自动生产线。而我们组仍然持续了上一年的模式。而且虽然吸取了第一年的教训,现金收入、支出算得很细,但是太开放了,大胆使用贴现。由于我们的开放的市场考虑的比较长远而实际可用资金较少,我们耽误了利润飞跃
的时机,在第四年才追上或开始超过其他个别组的净利润。实际上,贴现利息看似是不必要的、额外的支出,但有付出必定有回报。合理贴现的支出可以为企业抢占先机。由此看来,在任何时候都要用辩证的方法分析问题,有付出一定有回报,能精算支出,也一定要能有眼观计算到支出带来的收益。作为会计管理人员,一定要学会如何用好未来的钱。我认为这个发现是我此次试验最大的收获。
六、 实验分析、总结
先简单的说明一下,我是a组的营销总监。作为a组一路发展过来的见证人之一,我清楚地知道我们的发展路线和实施方案。我们a组虽说是11名女生,可是你们也可以看得出来我们的“野心”还是蛮大的,我们走得是开放性的企业发展路线,无论是对我们的生产能力还是销售领域都是从长远出发的外扩型。也许此次模拟的小小胜利也正是我们敢于抓住机遇,直迎挑战的结果吧。
其次,此次模拟实验,我印象最深的是市场分析和广告投放对一个企业的运营发展具有至关重要的作用。企业要生存就必须要获得订单,获得订单企业才有收入,才能持续运营。广告的投放将直接影响到企业的订单和企业的市场地位。我们组在广告这方面做得有些欠缺,在第一年到第四年的广告投放,我们一直是沾着半点运气的成分收获到满意且符合我们自身生产能力的订单,可是在第五年,我们的广告投放出错了。在第五年,我们组在抢订单这方面没有任何竞争优势,一我们没有成为任何领域的市场老大,二没有足够的资金投放到
广告上,所以造成了生产力闲置的窘境,导致第五年的收益急剧下降。
再者要提的是财务总监,我们组的财务总监以及几位助手同学都是十分细心的同学,他们在我们的公司运营过程中出了汗马功劳。在第一年的最后一个季度结束时,财务总监在计算所有者权益时发现没有平衡,但是她马上就能查出问题的所在并及时更正过来了;在第三年时,我们本来已经做到了第四季度,可发现生产力可以在之前的时候就进行改进,于是我们又推翻了前面四季度的运营,重新返回到第一季度重新购置入生产线然后进行新一轮的运营,好在我们细心的财务总监依靠强大的能力把账目重新一笔笔的改过来。此外,在计算广告投放量时,财务总监也总是在一旁仔细的计算可用额度,为我们的企业发展付出重要贡献。
并且,作为销售总监,我还认为市场分析是一个十分考验企业管理者的工作。通过市场分析,更好地认识市场的商品供应和需求的比例关系,采取正确的经营战略,才能满足市场需要,提高企业经营活动的经济效益。我和另外一个销售总监会思考如何开发市场,开发的时间和力度,各个市场的产品需求和价格都必须经过严密的分析。同时,还要注意其他组的市场开发策略和广告策略精会直接影响到企业的生存环境。只有经过仔细分析,摸透市场和竞争对手,企业的决策者才能做出有效的市场决策和广告决策。
这次实验课是我在大学阶段上的最有意义的课程之一。不管是erp原理应用方面,还是作为比赛的娱乐性,甚至在哲学层次人生观的塑造上,这两年的课都将令我终生难忘。无论成功与失败,这两
年的课都让我受益匪浅,在各方面都给予我新的启迪。衷心希望以后还能有幸获得这样的机会,同时感谢老师耐心专业的指导。 总之,我认为这次的erp沙盘模拟带来的收获远远不止我所说的这么点,一个团队、一个企业的合作发展都需要各个职位的人的共同努力。虽然只是模拟经营,但我还是学到很多东西,对企业经营的过程有了初步的了解。同时使我更进一步地认识到团队的总用,提高了协调组织的能力,这些都是以后实际工作的宝贵经验!
最新实验动物的心得体会及感悟八
1、通过对erp沙盘实验,构建公司,模拟对公司的运行操作来深入加强对已有erp理论知识的了解并学习巩固自身薄弱的erp知识。
2、通过在实验室沙盘模拟实践公司的运行,培养小组成员间的实践能力,提高素养,加强未来就业实践的基础。
3、通过对erp沙盘模拟实验,加强小组成员之间的协调沟通,培养学生的分析能力、合作能力、沟通能力、动手能力和创新能力。
4、通过对erp沙盘模拟实验,总结实验经验,概括实验成果,分析实验当中能够的不足,整理模拟实验数据,撰写实验报告,提高自身的模拟研究水平。
5、 掌握如何通过沙盘展示企业的各种资源,按照既定流程开展经营活动;通过学习并模拟企业经营,有意识地培养学生的学习能力、沟通能力和团队合作能力。
企业erp沙盘模拟综合实训
综合楼a 803室
张政强、王文珍、李玲瑞、马彦文、李艳、南东梅、赵竞
在一定市场环境下,以小组为单位设计企业经营的基本理念、基本思路和基本方法,制定企业发展战略和经营策略,通过沙盘模拟企业运营的主要业务及其业务流程。
在erp沙盘模拟实验的过程中,我担任的角色是财务总监。
当老师带领我们做完起始年份的工作的时候,我对财务总监这个角色应承担的工作任务与责任,算是有了个初步的了解,此时我才真正的意识到我的工作确实是贯穿企业经营的各个阶段,责任之大,任务之巨。
财务总监的工作范围很难明确的界定,它是ceo的得力助手。
我的日常工作:跟随企业经营的进行,监督ceo的日常业务登记活动;支付企业的各项费用,并及时地核对帐目;对企业将要进行的战略规划,提出意见;规划企业的贷款业务;总体平衡企业的各项指标;
对产品市场分析是一个非常重要的环节,它对决策起着决定性作用。我们经过研究对各产品和各个市场有了一定的了解,发现b产品是必须要生产的,c产品在本地市场和国内市场都有不错的发展前景。于是我们就决定在前一年生产b的同时开发c,并且开发区域市场与iso9000认证。考虑到其他企业可能会对国内市场更有兴趣。而我们把目光放在区域市场的销售。并且还购买了一条全自动生产线,租了厂房来进行生产。
在第一年我们就进行了区域市场的开拓和iso9000的资格认证申请,争取在第一时间内进入市场并占取市场份额。但是由于我们在市场竞争订单方面没有做好,根据规则在第一年的市场订单主要是按广告费的投入多少来决定选单先后。我们虽然投入了不少的广告费,但是还是被别的组给抢了先机,失去了大量订单,也就影响了b产品在今后本地市场的销售量。由于订单较少,停止生产线只会增加更多的资金流失,所以生产线不能停,这也就导致还有3个单位的b产品库存。亏损较为严重。在往后的几年中,我们打了大量的广告,在部分市场也得了销售冠军,于是优先挑选了订单,但还是考虑不太周全,让两条生产线停产了一个季度,浪费了资源。还有就是我们的生产线太多,每年的折旧费、维护费都很多,使得我们企业的效益不是很好。虽然我们经营的还算平稳,但我们没有进行长贷,每年都短期借款,所以每年都面临还款的压力。这都是这次实验中的不足。
沙盘模拟使我们在学习过程中接近企业实战,短短两天中会遇到企业经营中经常出现的各种典型问题,我们必须共同去发现机遇,分析问题,制定决策,组织实施。在参与学习的过程中极大地激发了我们学习的积极性,极大地提高了学习效力,激发学习的潜能。
做完实验后我最大的体会就是意识到了团队活动的重要性:刚刚开始试验的时候虽然都分配好了每个人的角色和具体任务,但是因为是刚刚开始的缘故,每个人都充满了激情与好奇。导致有时本不是自己的任务自己做了,而本该是自己做的事儿自己却忘记做了,从而使整个局面有点混乱。但是后来认识到这个问题后在大家集体的努力下对其进行了调整与改正,自己都首先做好了自己应尽的义务,与此同时还尽量让各项任务有机的结合起来,是整个流程更顺利的走下去。
总之,在整个的经营过程中,无论是做为什么角色,都应该积极的参与企业经营的各项决策,同时大家应该互相的帮忙,团结合作,把企业的整体利益放在各自部门的利益之上,从企业的全局角度出发。做沙盘模拟使我对企业的日常经营活动有了具体的了解,而且也使平时学的理论知识具体地与实践进行了一次综合,加深了对理论的认识,提高了自己分析问题的能力。相信如果有下次的机会,我一定会做的更好。
最新实验动物的心得体会及感悟九
对细节传神的刻画,恰恰相反到好处地揭示人物的内心世界,这是本文的成功之处.
文章选材新颖,…这件事,乡村生活气息浓郁,富有儿童情趣.读后令人身心愉悦,舒畅.
本文取材真实生活,选材恰当,很有新意,段落分明,过渡自然,情趣盎然,可读性强.
全文节奏明快,语言清新,始终洋溢着诙谐与风趣,读来其乐无穷.
对…生动而详细的叙述,是本文的一天特色,也体现了作者观察的敏锐与细致.这是文章成功的一大要素.
本文内容生动丰富,语言新颖清爽,结构独特合理.
本文是一篇较为成熟的叙事明理之作,文章以准确流畅的语言,展示了实验的全过程,跌宕起伏,妙趣横生.小作者观察仔细,叙述时井然有序
对实验现象的描写,能切中要害,详尽而全面.文章体现了自然科学的趣味性和知识性,读来饶有兴味.
文章开头交待得十分清楚,起到总领全文的作用.结尾处寥寥数语,显示了作者探索科学奥秘的远大理想和坚定信心,催人奋进.
实验动物的心得体会及感悟 动物实验学心得体会(9篇)
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