微生物技术论文答辩问题(汇总12篇)

尊敬的公司领导：

您好!我是崔婉鸽，是一名即将毕业的食品与生物工程系本科生。作为一名生物技术专业的学生，我有着很强的动手能力。能熟练运用微生物等实验操作，同时我社会实践方面有一定的经验。20xx年暑假在陕西红心软香酥食品有限公司盒装部工作，20xx年暑期在陕西子祺食品有限公司做质检和统计工作。

实践是检验真理的唯一标准。20xx年暑假在陕西红心软香酥食品有限公司盒装部工作，20xx年暑期在陕西子祺食品有限公司做质检和统计工作。一个人只有把聪明才智应用到实际上工作中去，服务于社会，有利于社会，让效益和效率来证明自己，才能真正体现自己的自身价值！我坚信，路是一步一步走出来的。只有脚踏实地，努力工作，才能做出更出色的成绩！

手捧菲薄求职之书，心怀自信诚挚之念，我期待着能为成为贵公司的.一员，我会用行动来证明自己。最后，衷心祝愿贵公司事业发达、蒸蒸日上。

自荐人:崔婉鸽。

论文摘要：文章简要介绍了微生物不可培养的原因，总结了培养技术中存在的问题，提出如何改良培养微生物的技术，并阐述了模拟自然环境条件、强调微生物相互关系是提高微生物可培养性的关键。

论文关键词：微生物;培养技术;环境条件;生物细胞。

目前自然界中只有极少部分微生物能够得到培养，严重阻碍了对微生物生命活动规律的研究和微生物资源的开发。因此必须改进传统培养方法，采用新型培养技术，提高微生物可培养性，大量培养自然界中存在的微生物，从而更全面、准确地了解微生物细胞的生命规律、获悉微生物群落中各种微生物之间的动态相互作用和相互协调的规律，对环境微生物工艺进行准确地设计、精细地调控和高效地利用。

一、微生物不可培养的原因。

对微生物进行常规培养时，由于生活条件的改变，有些微生物不能适应而死亡，另一些则通过产生孢子进入休眠状态或改变细胞形态、进入维持一定代谢活性但不生长繁殖的“活的非可培养状态”，结果均表现为微生物的“不可培养性”。

实际上，微生物的不可培养性是由于对微生物生长条件及其规律性的认识严重不足，而采取了偏离微生物生长实际情况的培养条件所造成的，这些偏离具体可以包括以下几个方面：

(一)实验室中无法完全模拟自然界的环境条件。

由于目前监测技术和手段的限制，人们对微生物生存环境和自然条件的了解尚不充分。因此，人们没有或无法完全模拟微生物的自然生存条件，而通常将培养条件进行简化：将微生物置于恒温、恒湿、黑暗等环境中;将微生物限制在“板结”的琼脂或不扰动的液体介质中;简化微生物的营养组成没有提供微生物生长繁殖所必需的某些化学物质等等。所以在自然界中可以生长繁殖的微生物，在“纯培养”中生长条件得不到满足，从而导致了微生物的不可培养性。

(二)生长缓慢的微生物被忽视。

环境中很多微生物都聚集生长，当将这些微生物接种至培养基时，适合生长的微生物由于生长快而占据优势地位，它们对营养成分的大量摄取使生长缓慢的微生物得不到充足营养而生长受到抑制。

(三)采用高浓度的营养基质。

最初对微生物的培养是在富含营养的培养基中进行的，但是由于自然界中微生物数量庞大，其可利用的营养物质极度匮乏，多数处于“岔营养”状态。常规纯培养对这种认识不允分，通常将寡营养微生物迅速置于富营养状态，微生物初期的快速生长会产生大量的、微生物自身难以调节的过氧化物、超氧化物和羟基自由基等“毒性氧物质”，该类物质快速、过量的积累会破坏细胞内膜结构，导致细胞死亡，从而表现出微生物的不可培养性。

(四)环境微生物之间的相互关系被忽略。

微生物相互关系繁多复杂，包括：(1)种间的偏利共生关系和互惠共生关系，两者的共性是至少一个群体提供另一些群体所需的生长因子而使微生物群体获利;(2)群体感应，这种关系被认为是通过细菌间的信息交流来调控细菌的群体行为：细胞通过感应一种胞外低分子量的信号分子来判断菌群密度和周围环境的变化，从而调节相应的细菌表达以调节细菌的群体行为。以上这两种关系都是微生物生长所必需的。由于人们目前对环境中微生物之间多数复杂的相互关系所知甚少，采用的培养技术没有将这种关系考虑在内。纯培养技术将待培养的微生物与其它微生物群体、以及生存环境人为地分离开，种间的共生关系和信息交流被阻断，微生物缺乏必需的生长因子和信号分了而死亡，表现出微生物的不可培养性。

摘要:21世纪，世界上的各类科学技术和专业学科都有了长足的发展和进步，比如说生物化学学科、免疫学学科等，其中作为代表性研究项目的分子生物学得到了越来越多人的关注，随着现代化设施的更新和计算机技术的发展，分子生物学的相关研究成果被大量运用在人们生活中，促使了社会的长久进步。

关键词:分子生物学;食品;微生物。

1分子生物学的概念阐述。

分子生物学作为一种基础性学科，将分子作为一种物质来研究生命的相关现象，比如构成细胞的物质，能够发生何种物理和化学变化。

在进行探究的过程中，这种学科代表了人们由探究生命的出现和进化，可以得到生命所表达的重要意义。

2分子生物学在食品微生物检测中的应用意义。

分子生物学的各项研究成果已经渗透进了人们的实际生活中，而且起到了促进社会发展，和为全世界解决实际问题的作用。

比如将酶催化产生的反应和原因运用到各类化学工业活动中，人工进行酶的模拟并生成新的催化剂，不仅能针对性地解决问题，还可以在化学工业领域领导新的革命。

除了在化学方面有所益处，对食品安全方面也有巨大意义，它能够更新微生物检测技术，提升了食品安全，保障了食品加工过程中产品的质量和人的健康。

3基于分子生物学方法的食品微生物检测技术研究。

3.1以电泳为主导技术的dna图谱技术。

由于排列顺序不同的dna的片段会在变性剂浓度不同的情况下发生改变，利用不一样的解链行为，使排列顺序不同的dna的片段会停留在不同位置的凝胶上这一特性，提出了dgge技术来检测核酸序列，在被变性剂染色成功后，会在凝胶的各个位置上出现条带状物体。

这种技术已经被越来越多相关企业运用，进行食品微生物的抽离或测定，检测微生物的数量等。

等人2004年在南非对含益生菌对食物进行了dgge技术检测[6];milicanikolic等人则在南非自制的山羊奶干酪中进行了pcr-dgge检测。

在dgge之后出现的na指纹图谱技术，也叫做温度梯度凝胶电泳，不同于dgge的凝胶中使用尿素和甲酰胺浓度梯度的方法，温度梯度凝胶电泳使用了温度梯度和在引物的5′端增加3050bpgc片段的新技术。

这种新的方式可以有效地统计出某一区块内，微生物的数量和品种，还可以检测出其他未知的肠道细菌，虽然zoetendal等人已将这项tgge技术运用在了人粪样微生物的探究分析中，但是针对食品的运用还很少。

4随机扩增多态dna技术(rapd)。

通过将随机的引物进行pcr反应，并加重靶细胞dna的比例进行分析，这一方法被称为rapd分析，它能够让研究人员了解dna的片段的大小和数量，再根据dna在不同基因组中的差异做出判断。

这种方式能够将全部dna基因定位成目标对象，可以辨识极小的差别，非常适合运用在研究成果少，特点不明显的或是dna序列不凸显的真菌和乳酸菌的研究中。

等人利用rapd-pcr技术发现了隐藏在红葡萄酒中的植物乳杆菌，walczak等人利用rapd分析法得出了非生产用酵母菌株与标准清酒假丝酵母菌株具有相近的遗传特质。

此外，针对葡萄球菌、大肠埃希氏、沙门氏菌和志贺氏菌等研究，都采用了这种技术方法。

5基因探针检测方法。

1968年，华盛顿卡内基学院的britten等人研究提出了核酸分子杂交技术，也叫做基因探针技术，这种技术的提出为分子生物学的dna分析方法奠定了基础，也成为了全球范围内被使用最多的分子生物学技术。

基因探针是一种具有特定标记的基因碎片，具有检测功能的原理是采用了碱基的配对，通过退火让两条互补的核酸单链成为双链。

这种检测技术可以用来检测食品微生物，具有方便快捷，直接有效的特点，使食物免遭致病性微生物的损害。

病原体其本身具有特殊的核酸碎片，利用已经做好分离和标志的核酸探针，将与需要检测的样品结合过的标记物进行监测，如果检测的样品中本身就有确定的病原体，那么探针和核酸序列就会有所结合。

这种基因探针检测技术的优势在于，能够非常灵敏地检测出不同，而且还具备了组织化学染色的特点，即可被见的特性和可定位的特点，所以能够检测出食品中的致病性细菌。

就现在来说，世界各地都提出了各种能够检测食品微生物的基因探针，比如说moseley等人提出的生物素标记的沙门菌基因探针，以及kerdahi等人提出的能够测试出单核细胞增生的李斯特菌的，来自非放射性dna探针，还有陈倩等人能够检测出esiec大肠杆菌的，根据hpi毒力岛基因生成的rp-z探针。

另外还有已转变为特殊商品的基因探针试剂盒。

美国的genetrak公司采用特殊的基因探针对沙门菌、李斯特菌和大肠杆菌的rrna进行检验[6]，最后得出了脱氧核糖核酸杂交筛选比色法。

主要检验方式分为以下几步:。

(1)需要一种与细菌rrna相反的基因探针和一份完成增菌培养的样品，细菌溶解之后与带有荧光素标记的探针互相杂交。

此时样品中存在靶细菌rrna，则带有荧光素和多聚脱氧腺嘌呤核苷酸(polyda)的探针互相杂交将成立。

(2)将包被多聚脱氧胸腺嘧啶核苷酸(polydt)的固相载体测杆与杂交溶液反应，如果polyda和polydt间的碱基出现配对，那么杂交核酸分子就被固体载体获得，并将这种分子培养在辣根过氧化酶-抗荧光素接合剂中，使探针上的荧光素与结合剂溶合。

(3)固体载体首先放置在酶底物-色原溶液，再由辣根过氧化酶与底物反应，最后用酸终止，在450nm处计量吸光度的多少，就能确定样品中是否存在靶细菌。

6基因芯片。

上世纪90年代中期出现的基因芯片技术，也就是dna微阵列(dnamicroarray)，使用微加工技术构建出能将人工产生的基因片段，紧密结合的、排列有序的出现在硅片等载体上。

再根据被荧光检测系统扫描过的，和标记样品杂交后的芯片，利用计算机进行分析检测，得出定性、定量的结果。

由于基因芯片技术能够高度地自动处理大量信息，所以能够快捷准确地检测食品安全。

运用基因芯片技术进行病原体检测的有:berger等人进行的12株嗜酸乳杆菌检测;wang等人进行能够具有超强特异性和灵敏度的肺炎链球菌检测;高兴等人对痢疾志贺菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌、霍乱弧菌、肉毒梭菌、肺炎链球菌、布氏杆菌、嗜肺军团菌等16种病原细菌进行检测。

但就目前的技术来说，基因芯片的应用还不够完善，首先，基因芯片所需的设备价格不低，制作成本很高，普通实验室没有足够的经济能力可以负担。

其次，基因芯片的特异性还不够明显，假阳性和假阴性会对实验结果的精准程度产生影响。

最后，基因芯片技术在进行过程中，各项数据和参数还没有形成统一的标准，对可重复性会产生影响。

只有不断完善自身解决上述问题，基因芯片技术才能被更广泛地运用在全世界的各个领域。

伴随着全球食品贸易的发展，检测食品病原菌也越来越重要，只有更方便快捷地完成食品安全检测，将分子生物学的检测方法运用于日常生活，才能更好地发挥这项学科的魅力，研究出真正实用的食品病原微生物快速检测方法。

参考文献。

[5]陈倩,程伯琨.基因探针检测食品中具有hpi毒力岛的esiec大肠杆菌[j].食品科学,2000,21(7):35.

作者:黄卉单位:肇庆医学高等专科学校。

生物技术的主要目的是生产有益的物质，对动物来说，就是使动物在生理活动过程中生产出对自身对周围有积极作用的物质，相同的，对植物来说，就是使植物在生命活动的过程中，产出对植物自身和环境有益的物质，将这一技术应用到农业水污染的治理上可以有效的对已经污染的水资源进行补救。生物技术的主要研究领域是生物的细胞和基因，生物的一系列生理结构特征可以和水资源污染相互合作，例如它具有吸附性，降解性等。生物技术是当前科技飞速发展的新型技术，还处在不断探索的阶段，所以在它广泛应用之前上还需要解决一些问题，包括农业污水处理的利用。

2目前我国农业水资源污染状况。

2.1化肥的大量不合理使用。

中国的农业发展时期，农业生产者一味的追求生产量，对土地使用大量的化肥，而化肥使用超标，会使得土壤中的水分营养价值严重下跌，也进一步污染了地下水。中国在化肥的使用上已经超过了其他的任何国家，位居全