沉降观测个人心得体会 沉降监测总结结论(四篇)
我们在一些事情上受到启发后,可以通过写心得体会的方式将其记录下来,它可以帮助我们了解自己的这段时间的学习、工作生活状态。那么你知道心得体会如何写吗?下面我给大家整理了一些心得体会范文,希望能够帮助到大家。
关于沉降观测个人心得体会一
1、取96孔90°v形酶标板,用微量移液器在第一至第五排的1~12孔每孔加25 μl pbs液。
2、吸取25 μl标准禽流感抗原加入到第一排第1孔中充分混匀。
3、从第1孔吸取25 μl混匀后的抗原液加到第2孔中,混匀后吸取25μl加入到第3孔中,依次进行倍比稀释至第二排最后一孔即第24孔,最后弃去25 μl。第三排孔至第四排孔同上操作。
4、依次向第一至第五排孔的每孔中加入25 μl 1%的鸡红细胞悬液。
5、将酶标板置于微量振荡器上振荡10秒,室温(20-25℃)静置30 min观察结果(如果环境温度太高,可置4℃环境下)。
6、结果判定:将板作45°倾斜,观察红细胞是否呈泪滴状流淌。以完全凝集(不流淌)的抗原或病毒最高稀释倍数为1个血凝单位(hau)
1、根据血凝试验结果配制4hau抗原。(即1hau抗原除以4)
2、取96孔v形酶标板,用移液器在第1~12孔各加入25 μl pbs。
3、在第1孔加入25 μl被检血清,充分混匀后移出25 μl加至第2孔,依次类推,倍比稀释至第12孔,弃去25 μl。
4、按以上步骤加入阳性血清和阴性血清(各做两份),作对照孔。
5、在第1~12孔各加入25 μl 4单位抗原,置于微量振荡器上轻轻混匀,室温20-25℃下静置30 min。
6、每孔加入25 μl 1%的鸡红细胞悬液。置于微量振荡器上轻轻混匀,室温(20-25℃)静置40 min后观察结果,若环境温度过高,可于4℃条件下进行,红细胞将呈明显的纽扣状沉到孔底。
7、结果判定:只有阴性对照孔血清滴度不大于2 log2,阳性对照孔误差不超过1个滴度,试验结果才有效。 将酶标板作45°倾斜,以完全抑制红细胞凝集的最大稀释倍数判为该血清的血凝抑制滴度。当被检血清效价大于等于4log2,判为禽流感抗体阳性。
1样品的保存及试验前处理
1.1 采集的血液样品应及时分离血清,最好分装至离心管中,标记清楚,离心后吸出血清,对应编号冷藏送检,并禁止运输过程中剧烈震动。
1.2 一般情况下,在5天内检测的样品可放置在4℃的冰箱中冷藏,否则低温冷冻保存。
1.3 在检测前血清样品应充分混匀,混匀时采用上下缓慢颠倒几次的方法即可,切忌剧烈振荡而引起产生气泡及血清中蛋白变性。
1.4 对出现胶冻状的血清样品,可采用反复搅动几下再离心的方法有助于缓解该状态。胶状物是含纤维蛋白和纤维蛋白原的血清,可能是由于放置时间不够造成的血清未完全析出状态。不建议直接吸取其中少量的清亮血清。
1.5 水禽等样品为排除非特异性反应,还应相应进行灭能反应。具体操作方法:56℃水浴锅30min或加等量10%鸡红细胞,轻摇后静置30分钟,离心,收集上清液即可。
2器材的选择
2.1 酶标板的选择:
建议使用96孔90°v型板进行试验,通过反复试验证明:90°v型板相对于110°板及130°板来讲,具有红细胞沉降速度快,产生的凝集图像清晰、结果容易判定等优点。
2.2 移液枪的选择及使用:
①单道、多道可调微量移液枪应选择合适的量程,以便精确度的提高。
②使用时应采用一档吸液二档排液的方法。吸取液体时,枪头要深入液下缓慢平稳吸液。加缓冲液时
应加在板孔底部。倍比稀释血清时,应每孔至少反复吹吸6次,以便混合均匀,还应注意尽量避免产生泡沫引起混合不均。加抗原及红细胞时应在板内液面上方加样,以免交叉污染,影响试验结果。
③加样、倍比稀释时应高度集中注意力,以免漏加、重复加样等。
3试剂的保存及配置
3.1 禽流感血凝抑制试验所用的抗原、阳性血清应严格按照说明书的要求进行保存和配置,试验前应提前将其恢复至室内温。抗原的保存温度为-20℃,反复冻融会降低抗原的滴度,应避免反复冻融。
3.2 ph7.2、0.01mol/l的pbs液的制备
①应尽量现用现配
②每次使用前应测ph值,以免时间过长而导致ph值发生改变。
③由于ph试纸跨度范围偏大,ph值不易准确介定,因此最好采用酸度计准确测量ph值,以提高试验的精确度。
④全部试验均采用同一种稀释液。
3.3 1%红细胞的制备
①为避免有些鸡只的红细胞有自凝现象,因此配制1%红细胞悬液时应最好选择采取2-3只spf鸡或未进行过任何免疫过的成年公鸡血液。当然采血的前提条件是要按十分之一采血量比例在一次性注射器中加入抗凝剂,如肝素、枸椽酸钠、柠檬酸钠等。
②采血完毕后最好分装至2ml容量的圆底离心管中,因为通过2ml与1.5ml两种容量离心管相比较,放入1.5ml尖底离心管中的话,离心后,离心管底部红细胞不易与加入的pbs液混匀,易沉积在管底部,达不到洗脱干净的目的。
③经20xx~3000r/min,5~10min,弃去上液和红细胞上层的白细胞薄膜,再加入十倍以上血量的pbs液,上下缓慢颠倒(切忌用力过大使红细胞破裂),使其充分混匀,再离心弃去上清液,反复几次直至上清液清亮透明为止。
④在加红细胞过程中还须不断轻摇以确保红细胞均匀,使其每孔加入相同数量的红细胞。
⑤制备好的红细胞液如果放置后上清液变红,说明有溶血,不可再使用。
3.4抗原液的配制
①先做血凝试验测定效价,以抗原与红细胞完全凝集的孔为1hua抗原,配制4hua抗原应往前推算两孔,即除以4后的值。
②每次做试验前,必须重新检测禽流感抗原的血凝效价,以免效价发生改变而导致抗原稀释倍数不准确,从而导致试验结果不准确。
③为保证配制的抗原准确,还要进行抗原回滴试验。具体方法:做二排抗原回滴,在两排的第1~8孔各加25微升pbs,取4hau抗原25微升加在两排的第1、第2孔,混匀,从第2孔倍比稀释至第4孔,弃去25微升,另一排同样。从第2至第8孔补25微升pbs,以保持75微升总量不变,另一排同样。两排的第1至第8孔各加25微升1%红细胞,震荡10秒钟。静置30分钟观察结果。这样在第1孔为4hau抗原,第2孔为2hau抗原,第3孔为1hau抗原,第4孔为1/2hau抗原,均为75微升总量,第5至第8孔为空白对照。如果抗原回滴试验不成立,应相应调整抗原浓度直至回滴试验成立。因为如果抗原浓度过高,则所测定的抗体效价水平偏低,如果抗原浓度过低,则所测定的效价偏高。所以不调整抗原浓度至实验成立的话会对结果有很大影响。
4结果的判定
每次试验必须设阳性及阴性(空白)对照血清,判别试验是否成立。判读结果时,将酶标板倾斜45°,以孔底沉淀的红细胞流动性好,呈泪珠样流淌,边缘无凝集颗粒为凝集完全抑制。
5试验器具的清洗
每次试验完毕后,应将酶标板中液体甩净,然后用自来水反复冲净每个孔,再放入3%naoh中4小时,清水反复冲净,再放入3%hcl中4小时,清水反复冲净,再用蒸馏水反复冲洗几次,甩干水份,入干燥箱中干燥备用。实验用烧杯、加样槽、量筒等也应充分洗净、干燥。以免器具内有杂物、污物以及残留物从而影响试验结果。
在进行禽流感血凝抑制试验时,应充分考虑到各方面的影响因素,提供的检测结果才会真实可靠,准确掌握禽类的免疫抗体水平,进而为科学防控禽流感提供理论依据。
关于沉降观测个人心得体会二
依据《民法典》、《中华人民共和国建筑法》、《中华人民共和国测绘法》等相关法律法规的规定,甲、乙双方本着平等互利、诚实信用的原则,经协商一致就 沉降观测工程的有关事项签订如下合同条款,以兹共同遵守:
1、工程项目名称:
2、工程项目地点:
3、工程建筑面积:
4、包干工程范围及内容:
5、工程质量等级:优(质量标准的评定以国家或行业的质量验收标准、项目所在地要求及合同约定标准为准)。
1、测绘内容
项目 #楼沉降观测, 共 栋进行沉降观测,并提交沉降监测报告。
2、作业依据
该楼的设计图纸及相关的技术资料;
《国家一、二等水准测量规范》gb12897-91;
《建筑变形测量规范》jgj/t8-20__。
3、技术要求:
4、沉降观测工期
按设计要求,沉降观测工作于 开始,进行第一次基础沉降观测点的观测; ,第二年观测二次(每六个月观测一次),第三年观测一次或者观测至沉降稳定为止。
1、合同价款(本合同所涉及价款均含税)
本合同采用固定综合包干单价方式计价,测量费按 元/栋/次,观测预算总价款(含税金)暂定为人民币 元(大写: )。
该包干单价包含但不限于设备进退场费、沉降观测水准基点深式埋设费、沉降观测点埋设费、观测费、资料整理费、出报告费、工程验收配合费、水电费、观测点修复费、税金等全部费用,除本合同另有约定外,不再因任何理由予以调整。
2、付款方式
本合同无预付款,按测量进度、次数付款。
每次付款前乙方均应向甲方提供乙方机构所在地开具的服务业发票或地税通用机打发票。
3、本合同价款为上述工作内容(详见施工图纸)的总价款,不再另行追加合同价款。若有变更,双方必须签订补充协议,否则甲方有权拒绝结算变更部分的工程。
4、因甲方原因造成工程停工时间长达 个月或因建筑物突然发生大量沉降、不均匀沉降或严重裂缝等意外情况及观测期满沉降量未稳定等原因,产生的工作量的增加,其测量费按 元/栋/次收取。
甲方驻工地代表(工程师)姓名:
乙方驻工地代表(项目负责人)姓名:
1、应当协调乙方进现场,并对乙方进场人员的工作提供必要的条件。
2、配合乙方作好沉降观测基准点和观测标志点的埋设工作。
3、负责对施工单位和施工人员作好保护测量观测点的宣传和教育工作。
4、审核乙方所报的中间观测报告及最终监测报告。
5、负责施工过程中对乙方的工程质量、安全、文明施工和进度进行监督和检查。
6、有权要求乙方撤换由其派遣或雇佣的不能胜任、玩忽职守、工作不负责任的工作人员。
7、为乙方提供电源、水源,费用由乙方自行承担。
8、由于甲方原因造成乙方窝工及特殊情况(工程量变化、自然条件影响以及非乙方原因造成停工等),工期顺延。
9、如因施工单位在施工中破坏观测点,或因此需进行观测点重新埋设的,由甲方负责协调。
10、甲方对乙方提供任何资料(含阶段性成果)的审核、确认或同意,均不免除或减轻乙方应承担的质量瑕疵责任。
1、委派现场代表 负责观测期间的全面管理。该现场代表须持有与本观测项目相适应的资格证书,如变更现场代表应事先经甲方书面同意。
2、设计施工方案图,报甲方审核通过后按图施工,并承担图纸设计费用。
3、合同签订后,乙方在接到甲方通知后2天内进场,进行基准点和观测点的布置埋设。
4、根据甲方的有关资料和技术要求,按照国家现行规范组织测量队伍进场作业,按时按质按量为本工程提供可靠、准确、详细的观测资料数据。
5、乙方自行雇用职工并负责支付其工资,并对其职工的行为及劳动安全负完全责任。
6、观测过程中提供中间报告,在本项目竣工验收前30日内(具体时间以甲方通知为准),向甲方提供施工过程中的沉降监测报告及数据资料,并最终提交沉降监测报告及全套电子版的报告。
7、乙方及时参加甲方组织的各种会议,遵守甲方的现场管理规定,组织勘测队伍安全文明施工。
8、乙方应保护成品、半成品观测点,并做明显标识。对于观测点的破坏,乙方负责修复,最大限度的保证甲方报告的完整性,并负责协调报告验收和存档。
9、乙方对观测数据及分析报告负保密义务,非经甲方书面许可,不得向任何第三方披露。
1、如果乙方未完全履行合同即中途退场,应退回甲方已付款项,并支付甲方本合同总价款20%的违约金,
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