实验心得体会万能版 万能的实验报告心得(八篇)

从某件事情上得到收获以后，写一篇心得体会，记录下来，这么做可以让我们不断思考不断进步。我们想要好好写一篇心得体会，可是却无从下手吗？下面是小编帮大家整理的心得体会范文大全，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

有关实验心得体会万能版一

学习重结晶法提纯固态有机物的原理和方法;

掌握抽滤操作方法;

利用混合物中各组分在某种溶剂中的溶解度不同，而使它们相互分离;

一般过程：

1、选择适宜的溶剂：

① 不与被提纯物起化学反应;

②温度高时，化合物在溶剂中的溶解度大，室温或低温时溶解度很小;而杂质的溶解度应该非常大或非常小;

③溶剂沸点较低，易挥发，易与被提纯物分离;

④价格便宜，毒性小，回收容易，操作安全;

2、将粗产品溶于适宜的热溶剂中，制成饱和溶液：如溶质过多则会成过饱和溶液，会有结晶出现;如溶剂过多则会成不饱和溶液，会要蒸发掉一部分溶剂;

3、趁热过滤除去不溶性杂质，如溶液颜色深，则应先用活性炭脱色，再进行过滤;

4、冷却溶液或蒸发溶液，使之慢慢析出结晶，而杂质留在母液中或杂质析出，而提纯的化合物则留在溶液中;

5、过滤：分离出结晶和杂质;

6、洗涤：除去附着在晶体表面的母液;

7、干燥结晶：若产品不吸水，可以放在空气中使溶剂自然挥发;不容易挥发的溶剂，可根据产品的性质采用红外灯烘干或真空恒温干燥器干燥，特别是在制备标准样品和分析样品以及产品易吸水时，需将产品放入真空恒温干燥器中干燥;

乙酰苯胺(含杂质)：灰白色晶体，微溶于冷水，溶于热水;

水：无色液体，常用于作为溶剂;

活性炭：黑色粉末，有吸附作用，可用于脱色;

含杂质的乙酰苯胺：2.01g;

水：不定量;

活性炭：0.05g;

m乙酰苯胺=2.01g

m表面皿=33.30g

m表面皿 晶体=34.35g

△m=34.35-33.30g=1.05g

w%=1.05/2.01*100≈52.24%

1、水不可太多，否则得率偏低;

2、吸滤瓶要洗干净;

3、活性炭吸附能力很强，不用加很多;

4、洗涤过程搅拌不要太用力，否则滤纸会破;

5、冷却要彻底，否则产品损失会很大;

6、热过滤前，布氏漏斗、吸滤瓶要用热水先预热过;

7、当采用有机物来作为溶剂时，不能用烧杯，而要采用锥形瓶，并且要拿到通风橱中进行试验;

有关实验心得体会万能版二

21世纪初

闲鹤棹孤舟

人类

远古时代

据理论依据表明,从远古时代算起,有100亿年,过去了50亿年,还有50亿年,但是,现实问题将有效期减短,例如能源缺乏,水资源污染，空气污染，树木砍伐等。

20世纪六十年代至九十年代的人

(1)抽样，抽取n人

(2)在人类中加入“金钱”“权利”，发现迅速反应，并且只需少量的“金钱”与“权利”就可以将人类完全腐蚀，可见，“金钱”与“权利”对人类的诱惑性是非常大的，人类也常常为它们失去本性，但尽管如此，当将人类置于“金钱”、“权利”两旁时，人类不是避免受它们腐蚀，而是争先恐后地去接触它们，希望让它们腐蚀，这种现象在化学界是非常罕见的。

（3）在人类中加入“道德”与“法律”发现人毫发无伤，而“道德”与“法律”却消失了，仔细观察，深入研究，才知道是人类散发出的“亲情”作祟，人类接触到“道德”与“法律”后，便从体内散发出一种“亲情”的物质，使“道德”与“法律”消失，从而达到保护自己的目的，发现“亲情”这种物质在人体内含量相当高，如果不用大量的“道德”与“法律”是无法将“亲情”消耗殆尽的，经研究，原来是人类长期积累的成果，并且这种亲情已变性，不是纯朴之情。

（4）检测人的化学组成，发现“损人利己

“帮亲不帮理”、“舍一切而取生”、“自私自利”元素含量相当高，“知识”、“信任”、“乐于助人”、“诚信”、“善良”等元素几乎没有，“生活自理能力”这一元素在青少年阶段尤其少见。

据探究发现，人类是一种非常喜欢“挑战”的动物，例如，向大自然挑战：人类砍伐树木，把脏水倒入河流，把废气排入空气中，导致环境恶化，动物濒临灭绝.但人类还自以为了不起，认为自己是一切的主宰，对大自然的警告不以为意，说不定以后人也会濒临灭绝！

人类是一种自私自利、贪生怕死、没有羞恶廉耻之心的动物，鉴于当时潮流的影响、实验器材的不完备和人类性格的多变性，故需要下个世纪再次测验，希望结果有所好转，不不不，应该是希望还有实验品供我们测验。

有关实验心得体会万能版三

连续九周的erp沙盘模拟实战课程在紧张而又略有激动的气氛中结束了，这门课带给我们每个人的收获都很多，有共同的东西，比如团队协作、各司其职、不轻易放弃的精神，面对困难将损失减小到最小的深刻意识，也有很多不一样的东西，比如大家在不同分工中所学到和体会到的。在这门课上我们通过以一个小组团队来模拟经营一个企业，各自分工扮演不同角色，努力使得企业能够在连续、业绩不断增加的情况下经营下去。这九周的课程中，从第一堂课一片茫然到如今已经完全了解其运作机制、规则，是一个很大的变化。九周的实战经验必须要经过再一次的深刻总结才能将一些经验教训细致化，并且在下次实际操作中才不容易犯类似错误。因此，最后的总结是十分必要，也十分重要的。

我们小组是第七小组，我在团队里担任的是ceo一职，按照原先计划我本应是负责规划策略，布置工作，然后整合各种意见及建议做最终的决策的，但是基于在初期对规则等不是很熟悉，导致在第一轮都是集体讨论摸索，而后来在公司经营的整体规划上，逐渐演变成由财务总监（谢优男）和生产总监（杨小双）负责主要的生产投资的决策工作。而我在初期负责实际的鼠标操作和所有报表的整理、分发，在后期负责的是订单登记、产品销售、综合费用表、无形资产投资表的填写工作，并参与广告投放、贷款、生产线建设、转产等问题的讨论，以及进行组间交易等。总的来说，我们小组的分工并不明确，其主要责任在我本身，但总体下来，结果还算让人较为满意，期间也出现过几次失误，比如由于生产总监的计算失误导致下错原材料订单，或是在广告投放过于超前，投放失误，当然在这些问题出现的时候，大家都没有持续沮丧而是努力想办法把损失降到最小。具体到我自己工作的感受，我想值得反思的很多，主要还是自己做的不够，没能胜任，尤其是在计算这一部分搞不清楚导致决策权都由生产总结和财务总结来决断。这是我觉得极其惭愧的。

关于下一次的规划，首先，我想肯定是先把分工分清楚，生产总监负责生产线、产成品等，采购总监负责原料订单，销售总监负责订单问题和广告投放等，贷款问题由大家共同决定。而我则负责整个流程的操作，在填表时相互协作。实际操作时，首先在第一年年初决定第一年的长期贷款额度。其次是厂房和生产线建设，产品的研发和生产规划，之后包括管理费、维修费、建成后的折旧等计算出现金支出的额度，以此来确定短贷，在前三年销售收入欠缺的情况下保证现金不断流是极为重要的。而到第四年之后基本就不会出现资金断流情况，因为可以贴现，相比长贷高利息和短贷还款紧张，是一个很好的手段。

其实上面已经基本阐述了我们小组的分工情况，虽然说这部分要详述，但是基于上面已经介绍，现在就简单全面的介绍一下，多余的不再赘述。基于之前所说我们小组分工并不细致，所以实际操作中大家的所负责的并不是名义上的部分。我们小组成员一共六人，我是ceo，在实际操作中负责报表汇总、分发，前期的鼠标操作和后期的订单等表的填写，生产总监（杨小双）负责生产产品记录、原料采购计算，财务总监（谢优男）主要负责决策工作，广告投放以及现金表、资产负债表、利润表的填写；销售总监（唐希光）前期负责填写填写订单登记表、综合费用表等，后期负责鼠标操作；采购总监（许钱乾）负责***表的填写。在广告投放、贷款贴现等的重要决策上，大家共同讨论。总的来说，生产总监和财务总结起到了核心作用。当然整体来说大家都十分认真的负责自己的工作，但是最大不足就是作为ceo的我没有分配好工作，导致大家的实际操作中的角色有点混乱。

1、筹资分析：关于筹资方面，期初我们已经有70m的本金，这在生产中的花费是远远不够的，因此贷款是最重要的一个筹资途径。因此在长期贷款、短期贷款的数额以及贷款时间成为一个极其重要的关键点。在贷款方面，第一年的贷款数额和形式决定了后面的发展，所以必须谨慎计划。第一年的贷款额要根据第一年及整体发展计划进行确定，如果第一年贷得太多那么每年的利息费会很高，在年末阶段会比较艰难，面临很大的还款压力。但是由于生产线建设、产品研发、广告投入等其他费用花费较多，因此必须贷够足够资金。在第二年初，由于前两年没有任何现金流入，如果第一年贷款数额比较少，此时就要根据自己第二年拿单情况计算出当年的销售额以及最后的权益（按照规则，下年可贷款额是上年权益乘三再减负债），就可知第三年初的贷款额。通常如果第二年销售额高，那么第三年可贷款；销售额低的话第三年就不能贷款或者只能贷很少。由于第二年开始阶段没有产成品入库，第二年的应收账款大部分是在第三年的下半年才能收到。为了在第三年不出现资金断流以及能继续进行发展，第二年是否贷款或者带多少款也非常的重要。公司经过第三年后会有所好转，权益会不断增加，贷款额度也会随之增加，资金压力慢慢减小。长短贷结合时比较好的方法，如果出现问题，可以及时补救。

2、投资分析：投资分析着重看广告投放，无形资产投资以及市场开拓。在对产品的广告投资方面，市场预测图是十分重要的，结合上年各组投放广告的方向及数目来预测接下来一年的市场广告投放情况。在投放广告时，需求少的市场要多投放广告，需求多的市场可少投放广告。前几年最好维持在10m左右，而后期随着产品增加可以提高到15m左右，抓准主要市场。此外，产品的价格，实际中各组的广告投放情况，竞争关系，产品卖出的重要性，某一产品在某一市场的走势，所有产品在某一市场的走势等等都是很重要的，还关系到下一年的市场老大问题。如果某一产品在某一市场的价格高需求少，我们就预计各组都会投较多广告，所以除了在此市场的该产品多投以外，在不降低销售额不浪费过多广告费的原则上集中对此市场投放广告，增大此市场的市场广告额，以此在看重的商品中占得先机。

3、生产分析：从企业发展的长远看，在经营过程中应扩建生产线。因为有生产线才有产品产出，有了产品才能卖出，才有可能提高业绩。在实际中，也要根据自身资金状况建设。在厂房方面，我们采用买大厂，租小厂并尽量早的租转卖。至于生产线的选择，由于手工线、半自动线生产效率较低，虽然成本较低但是为了长远发展最好选择自动线和柔性线。柔性线可以随时转产，到后期可以充分利用这点。在扩建生产线时要尽量选择现金流比较充足时期，以免资金断流。在7年期间最好可以建成10条生产线，这是比较能达到的目标。有了足够的生产线盈利便有了保证。

对于产品的开发，根据市场预测图及自身先进情况合理开发。不要盲目提早开发p3或p4，那样会导致无形资产投资增加，初期权益减少，成本增加但市场需求价格低，入不敷出，不是最佳选择。iso认证也是如此，对p3、p4进行认证之后价格较高利润也较高。柔性线在后期可以根据需要转产。

4、市场分析：

在期初，产品p1和p2在本地市场需求较大，但逐渐呈现下降趋势，而对p3、p4的需求增加。与此相应的价格走势，p1、p2逐渐下降，p3、p4逐渐上升。区域市场和本地市场相近。在国内市场上，p2、p3的前景持续看好，而p1在需求和价格上都比较弱。p3、p4在亚洲和国际市场上的需求和价格都处于高位。在国际市场中所有产品的价格趋势都较好。

考虑到p3、p4产品利润高，所以在保证前期企业销售适销的p1、p2获取一定销售收入后，三年或者之后应该加大对p3、p4产品生产的投入，增加盈利。其中发挥柔性线转产的作用，和iso认证的作用。

5、现金流分析：现金流对于企业来说是十分十分重要的，必须保证不能断流，否则直接面临破产危险。因此，在每季度、每年的支出，到账、还贷款、管理费、折旧等，都要详细计算。尤其是应收账款，关键时贴现十分重要的补救。特别地，每一年投广告前，要计算广告费、长期贷款本息、税费的总额。一年所用现金时，要分季、分应收账款更新前、后，以免导致现金断流或者不必要的贴现。在保证现金不断流时，贴现将发挥非常重要的作用，比长贷和短贷都合算。()6、盈利分析：关于盈利分析方面，我认为首先最重要的还是生产线，生产线多才能有更多的产出。在拿订单时如果某一产品的数量多，可以拿总价高的，以免卖不出去。数量少可以拿单价高的。当然，账期要特别注意。此外，在销量价格都很好的市场多投，保证订单质量，当然广告费也要节省，以免浪费。iso认证也很重要，价格高决定了其利润高。

1、与理论课程学习的关系：企业资源规划这门实践课程在开始并不知道这是一门实践课，与理论课最大的区别便是实践课是自己亲身处境去操作，心里更加兴奋，更积极的参与起来，当然理论来自于实践，并指导实践，通过实践之后又进一步加深了对理论的认识，实践中的经验和教训又演变成重要的理论提醒我们下一次不再犯同样的错误。两者之间并不是孤立的，可以说相互促进，不断完善。

2、对于我个人而言，在这门课上体会到了真正的现代管理技术，作为一名经济学专业的学生，这门课确实受益匪浅，明白企业经营中要面临的种种问题和考虑都要有整体性、全局性，同时还要细化到每一处。

1、课程建议：这是一门很有意义的课，在上课的过程中大家十分紧张的进行着，可能会因为一个鼠标失误，一个数字的失误而焦躁、沮丧，也会在拿到好订单之后开心，但是这门课让我们在上课中体会到乐趣的同时也是十分的紧张，课程有点赶，永远听着老师的催促，所以希望课时能延长点。

2、关于心得和收获：其实上面已经写了很多体会，总的来说这门课和别的课很不一样，大家都参与其中，很认真很带劲，但是最让我遗憾的就是自己在整个过程中没有把ceo的作用发挥好，我想这也是我对这门课最大的遗憾。希望以后在面对任何事都能把自己定位清楚，做好应该做的，也非常感谢老师这两个月来对我们的辛苦付出和耐心指导。erp沙盘模拟心得国际贸易实务模拟实验实训报告企业沙盘模拟心得体会

有关实验心得体会万能版四

1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构；

2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。

小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；

普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。

(一)细胞形态观察

l、动物细胞的观察

（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。

（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。

2、植物细胞的观察

取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。

（二）细胞的大小和测量

1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜的上透镜。

2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。

3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。

4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：

镜台测微尺的格数

目镜测微尺每格的微米数=————————— × 10

目镜测微尺的格数

1、目镜校正：40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数=17/70=0.24

2、细胞大小的测量：

五、作业与思考：

1、血细胞按含量高低，主要含有：红细胞，白细胞，血小板。

白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。红细胞：主要的功能是运送氧。 白细胞：主要扮演了免疫的角色，当病菌侵入人体时，白细胞能穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围，吞噬。血小板：止血过程中起着重要作用。细胞形态见下图。

2、植物细胞一般比动物细胞大一些。形态图见下。

3、在不同放大倍数下，测定的细胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍数越大，在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大，而更容易测量准确。

有关实验心得体会万能版五

辉光球发光是低压气体(惰性气体)在高频电场中的放电现象。 辉光球外表为高强度玻璃球壳，球内充有稀薄的惰性气体(如氩气等)，中央有一个黑色球状电极。球的底部有一块振荡电路板，通过电源变换器，将低压直流电转变为高压高频电流加在电极上。通电后，振荡电路产生高频电场，球内稀薄气体由于受到高频电场的电离作用而光芒四射。辉光球工作时，在球中央的电极周围形成一个类似于点电荷的场。当用手(人与大地相连)触及球时，球周围

的电场、电势分布再均匀对称，故辉光球在手指的周围处变得更为明亮，产生的弧线顺着手的触摸移动而游动扭曲，随手指移动起舞。这其实是分子的激发，碰撞、电离、复合的物理过程。人体为另一电极，气体在极间电场中电离、复合而发生辉光。

辉光球通电后呈静止样。当人手触摸时中间电极出现放电致球壳触摸处。五颜六色的闪电会随着手的移动而移动，球内出现放电现象。一旦手离开，闪电消失。

霓虹灯，把直径为12-15毫米的玻璃管弯成各种形状，管内充以数毫米汞柱压力的氖气或其他气体，每1米加约1000伏的电压时，依管内的充气种类，或管壁所涂的荧光物质而发出各种颜色的光，多用此作为夜间的广告等。

日光灯，亦称“荧光灯”。一种利用光质发光的照明用灯。灯管用圆柱形玻璃管制成，实际上是一种低气压放电管。两端装有电极，内壁涂有钨酸镁、硅酸锌等荧光物质。制造时抽取空气，充入少量水银和氩气。广泛用于生活和工厂的照明光源。

还有一种是氙灯，氙灯是一种高辉度的光源。它的颜色成分与日光相近故可以做天然色光源、红外线、紫外线光源、闪光灯和点光源等，应用范围很广。

人体辉光，疾病辉光，爱情辉光，意识体能辉光，“人体辉光监控”。

有关实验心得体会万能版六

质粒dna的提取、纯化及检测

姓名：xxx学号：2011001400xx年级：20xx级生物基地班 实验日期：20xx年9月16日—30日组别：6组 同组者：xx

1、掌握碱变性提取法提取大肠杆菌中质粒dna的原理和方法。

2、学习并掌握凝胶电泳进行dna的分离纯化的实验原理。

3、学习并掌握凝胶的制备及电泳方法。

4、学习并掌握凝胶中dna的分离纯化方法。

1、质粒dna的制备方法

质粒（plasmid）是独立存在于染色体外、能自主复制并能稳定遗传的一种环状双链dna分子，分布于细菌、放线菌、真菌以及一些动植物细胞中，但在细菌细胞中含量最多。细菌质粒大小介于1～200kb之间，是应用最多的质粒类群，在细菌细胞内它们利用宿主细胞的复制机构合成质粒自身的dna。

质粒dna的制备包括3个步骤：①培养细菌，使质粒dna大量扩增；②收集和裂解细菌；③分离和纯化质粒dna。主要方法包括：碱裂解法：0。2molnaoh 1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于质粒大量提取。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒dna的用途进行选择。本实验选择碱裂解法提取质粒dna。

2、质粒dna的提取——碱变性提取法

在细菌细胞中，染色体dna和质粒dna均被释放出来，但是两者变性与复性所依赖的溶ph值不同。在ph值高达12。0的碱性溶液中，染色体dna的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性；共价闭合环状质粒dna的大部分氢键断裂，但两条互补链不完全分离。因为它们在拓扑学上是相互缠绕的。当用ph值4。6的kac（naac）高盐溶液调节碱性溶液至中性时，变性的质粒dna可恢复原来的共价闭合环状超螺旋结构而溶解于溶液中；但染色体dna不能复性，而是与不稳定的大分子rna、蛋白质—sds复合物等一起形成缠连的、可见的白色絮状沉淀。这种沉淀通过离心，与复性的溶于溶液的质粒dna分离。溶于上清液的质粒dna，可用无水乙醇和盐溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性质类似，乙醇沉淀

dna的同时，也伴随着rna沉淀，可利用rnasea将rna降解。质粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通过酚/氯仿抽提除去，最后获得纯度较高的质粒dna。

3、凝胶电泳进行dna分离纯化

电泳（electrophoresis）是带电物质在电场中向着与其电荷相反的电极方向移动的现象。各种生物大分子在一定ph条件下，可以解离成带电荷的离子，在电场中会向相反的电极移动。凝胶是支持电泳介质，它具有分子筛效应。含有电解液的凝胶在电场中，其中的电离子会发生移动，移动的速度可因电离子的大小形态及电荷量的不同而有差异。利用移动速度差异，就可以区别各种大小不同的分子。因而，凝胶电泳可用于分离、鉴定和纯化dna的片段，是分子生物学的核心技术之一。

凝胶电泳技术操作简单而迅速，分辨率高，分辨范围广。此外，凝胶中dna的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接观察到，甚至含量少至20pg的双链dna在紫外激发下也能直接检测到。需要的话，这些分离的dna条带可以从凝胶中回收，用于各种各样目的的实验。

分子生物学中，常用的两种凝胶为琼脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝胶。这两种凝胶能灌制成各种形状、大小和孔径，也能以许多不同的构型和方位进行电泳。聚丙烯酰胺凝胶分辨率高，使用于较小分子核酸（5—500bp）的分离和蛋白质电泳。它的分辨率非常高，长度上相差1bp或质量上相差0。1%的dna都可以彼此分离，这也是采用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行dna序列分析的分子基础。虽然它能很快地进行电泳，并能容纳较大的dna上样量，但是与琼脂糖凝胶相比，在制备和操作上繁琐。琼脂糖是从海藻中提取的长链状多聚物，由β—d—吡喃半乳糖与3，6—脱水—l—吡喃半乳糖组成，相对分子质量为104—105。琼脂糖加热至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液体，浇在模版上冷却后形成凝胶，其凝固点为40—45℃。琼脂糖凝胶相对于聚丙烯酰胺凝胶分辨率低，但它的分离范围更大（50至百万bp），小片段dna（50—20000bp）最适合在恒定轻度和方向的电场中水平方向的琼脂糖凝胶内电泳分离。琼脂糖凝胶电泳易于操作，适用于核酸电泳，测定dna的相对分子质量，分离经限制酶水解的dna的片段，进一步纯化dna等。

琼脂糖凝胶电泳是一种常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而带有负电荷，在电场中向正极移动。dna在琼脂糖凝胶中的电泳迁移率主要取决于6个因素：样品dna分子的大小、dna分子的构象、琼脂糖浓度、电泳所用电场、缓冲液和温度。

1、实验仪器

培养皿、接种环、三角瓶、酒精灯、恒温振荡培养箱、50ml离心管、1。5ml塑料离心管（eppendorf管）、高速离心机、漩涡振荡器、微量移液器、不同型号枪头、天平、制胶槽、梳子、电泳仪、吸管、量筒、微波炉、灭菌锅、恒温水浴锅、试剂瓶、卫生纸和记号笔、手套等。

2、实验试剂

lb培养基，抗生素ap（氨苄青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te缓冲液，饱和酚，氯仿/异戊醇混合液，酚/氯仿/异戊醇（pci）混合液，预冷无水乙醇，tae电泳缓冲液（10×），上样缓冲液（6×），琼脂糖，溴化乙锭（eb），dna相对分子质量标准物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸钠。

1、准备实验

配制lb液体培养基，分装到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固体培养基；准备1000ul、200ul、10ul移液枪尖各一盒，1。5ml离心管若干于500ml三角瓶中，50ml离心管2个 ，将上述物品包好连同配好的培养基一同灭菌。

2、菌体培养

在含有ap的lb平板上挑取一环携带有质粒puc19的e。coli dh5单菌落，接种于20mllb液体培养基中进行37℃振荡过夜培养，培养基中加ap100ul

（100ug/ml），质粒puc19具有ap抗性基因，使得带有puc19的质粒得以生长。 过夜培养后菌体量大，杂质较多，然后用移液枪吸取过夜培养物2ml转接于50mllb液体培养基中，培养基中加入ap250ul，37℃振荡培养4—6h至对数生长期后期，生长速率快，代谢旺盛，酶系活跃，杂质少，适合提取质粒。

3、质粒提取

（1）称量空的50ml离心管的重量为14。331g，然后将三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒满，液面距管口约1cm，7000rpm离心5分钟后弃去上清液，收集菌体细胞。

（2）向离心管中悬滴加入5ml冰预冷的溶液ⅰ打散菌体洗涤，用漩涡振荡器使之充分悬浮后用枪尖吹吸混匀，同步骤（1）离心，弃去上清，将离心管倒置于吸水纸上，使上清液全部流尽干燥，然后称重得14。437g，则菌体质量为106mg。

（3）洗涤后每100mg菌体应加入冰预冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌体按100mg菌体处理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混匀，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使

溶液密度增加，悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部；维持渗透压，防止细胞提前破裂，防止dna受机械剪切力作用而降解。edta是ca2 和mg2 等二价金属离子的螯合剂，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生长。tris—cl溶液提供适当的ph。

（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（与溶液ⅰ对应），轻加轻摇，冰浴5min。溶液变清亮透明粘稠如蛋清状。溶液ⅱ中的naoh使细胞膜发生了从bilayer（双层膜）结构向micelle（微囊）结构的相变化导致细胞溶解。同时，强碱性使染色体dna、质粒dna和蛋白质变性；sds为下一步沉淀做铺垫。

（5）按比例加入冰预冷的溶液ⅲ1。5ml（与溶液ⅰ、ⅱ对应），轻加轻摇，冰浴10min。溶液出现白色絮状沉淀。沉淀为蛋白质sds复合物、细胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因为长时间的碱性条件会打断基因组dna，只要是50－100 kb大小的片断，就不能再被pds共沉淀。同时变性的质粒dna复性。反应形成的高盐环境进一步加速了沉淀。

（6）12000rpm离心15min，白色沉淀聚集在离心管一侧，用移液枪将上清液转移到另一洁净的离心管中。然后向上清液中加入1/10体积的3mnaac混匀，加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对dna很安全，因此是理想的沉淀剂。 dna溶液是dna以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去dna周围的水分子，使dna失水而易于聚合。在ph为8左右的溶液中，dna分子是带负电荷的，加一定浓度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna钠盐沉淀。

（7） 以12000rpm离心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，轻轻地覆盖沉淀，不打散沉淀，洗涤一次。

（8）以12000rpm离心5min，离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。去掉上清液，将离心管上沉淀部位做好标记，将离心管倒置于吸水纸上，干燥5min。粗提取的质粒呈浅黄色，随着水分的减少质粒变为无色。所以为了完全溶解质粒，要在离心管上标记质粒所在位置。

（9）将dna沉淀溶于1mlte缓冲液中，移液枪吹吸助溶，然后将溶解液转移到一个eppendorf管中。te是ph缓冲液，为dna提供稳定的生理状态，呈弱碱性，有利于保护碱基对。同时含有edta是二价阳离子的螯合剂，抑制dna酶作用。

4、质粒纯化

（1）eppendorf管中加入rnase a（纯浓度＞50ug/ml），37℃保温0。5—1h

（2）将上述的溶液平均分配到2个1。5ml的微量离心管中，每管0。5ml，分别加入与溶液等体积的（500ul）tris饱和苯酚溶液，振荡混匀，7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的eppendorf管中。苯酚是经tris饱和后的，显黄色。苯

酚加入后，溶液分层，苯酚向下，下层呈浅黄色，上层溶液无色，在中间产生大量白色沉淀，此为变性后的蛋白质。

（3）加入等体积的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到到另一洁净的eppendorf管中。苯酚是强的蛋白变性剂，但是苯酚留在质粒溶液中会影响dna的酶切，它本身易被氧化，会损伤质粒。氯仿也是蛋白变性剂，但是比酚弱，且能溶解质粒中的脂类，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。异戊醇则可起消除抽提过程中出现的泡沫，有利于分层更明显。此时溶液中已看不到明显的白色沉淀，但仍有蛋白质的存在。

（4）加入等体积的氯仿溶液，振荡混匀， 7000rpm，离心5min，上清液转移到一洁净的eppendorf管中，得上清液400ul。

（5）向上清液中加入1/10体积的naac混匀，再加入2倍体积的冰无水乙醇，混匀，—20℃下沉降30分钟。

（6）以12000rpm，离心15min，弃去上清液，得到dna沉淀，为白色。

（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗涤。然后以12000rpm离心5min，离心管底部dna沉淀所在面应与收集沉淀面一致。

（8）去掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，室温干燥。用50ulte溶解于1管中。

5、质粒检测

（1）称取0。4g的琼脂糖，置于一锥形瓶中，在三角瓶上标好液面位置，加入40ml的1×tae电泳缓冲液，再加入5—10ml重蒸水，以补充在溶胶过程中损失的水分。然后置微波炉加热至完全溶化，溶液透明。冷却至50℃左右，倒入制板槽制板。

（2）待胶凝固后，小心拔起梳子，使加样孔端置阴极段放进电泳槽内。在槽内加入1×tae 电泳缓冲液，至液面覆盖过胶面2—3cm。取1μl加电泳载样液和3μl质粒样品于小纸片上，用移液枪混匀。

（3）电泳1h，观察溴酚兰的带（蓝色）的移动。

（4） 把胶槽取出，小心滑出胶块，放进eb溶液中进行染色，完全浸泡约5min。

（5）凝胶成像仪观察。

（1）滴加溶液ii时，要逐滴加入，且要轻加轻摇溶液使之混匀，整体动作要快，因为强碱在溶液中停留时间不能过长，否则会破坏质粒dna。

（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮状沉淀，溶液iii中和强碱使质粒复性，不可剧烈震荡， 防止染色体dna断裂，应该上下颠倒离心管，使其混匀。

有关实验心得体会万能版七

实验目的:测量声音在空气中的传播速度。

实验器材:温度计、卷尺、秒表。

实验地点:平遥县状元桥东。

实验人员:爱物学理小组

实验分工:张灏、成立敬——测量时间

张海涛——发声

贾兴藩——测温

实验过程:

1 测量一段开阔地长;

2 测量人在两端准备;

3 计时员挥手致意,发声人准备发声;

4 发生人向上举手,同时发声,计时员计时(看到举手始,听到声音止)

5 多测几次,记录数据。

实验结果:

时间 17∶30

温度 21℃

发声时间 0.26″

发声距离 93m

实验结论:在21℃空气中,声音传播速度为357.69m/s.

实验反思:有一定误差,卡表不够准确。

有关实验心得体会万能版八

气体放电存在多种形式，如电晕放电、电弧放电和火花放电等，通过此演示实验观察火花放电的发生过程及条件。

首先让尖端电极和球型电极与平板电极的距离相等。尖端电极放电，而球型电极未放电。这是由于电荷在导体上的分布与导体的曲率半径有关。导体上曲率半径越小的地方电荷积聚越多(尖端电极处)，两极之间的电场越强，空气层被击穿。反之越少(球型电极处)，两极之间的电场越弱，空气层未被击穿。当尖端电极与平板电极之间的距离大于球型电极与平板电极之间的距离时，其间的电场较弱，不能击穿空气层。而此时球型电极与平板电极之间的距离最近，放电只能在此处发生。

一个尖端电极和一个球型电极及平板电极。

让尖端电极和球型电极与平板电极的距离相等。尖端电极放电，而球型电极未放电。接着让尖端电极与平板电极之间的距离大于球型电极与平板电极之间的距离，放电在球型电极与平板电极之间发生

雷电暴风雨时，最好不要在空旷平坦的田野上行走。为什么?