免疫胶乳浊度分析在自动(zìdòng)生化分析仪上的应用第一页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊回顾免疫胶乳浊度分析（immunolatexturbidimetry）在生化分析仪上进行测定的有关问题2第二页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊免疫检测的基础(jīchǔ)抗原抗体间的特异性反应手工操作核心—(héxīn)基自础动化分析3第三页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊免疫比浊技术是在免疫沉淀反应（Precipitation）检测法的基础上建立的。最早应用的免疫沉淀反应是Ouchterlony在1948年建立的琼脂双向扩散法。1965年Mancini等和Fahey等分别建立了可以定量的单向（辐射状）免疫扩散技术。Laurell等1966年建立了电免疫扩散法，使报告结果(jiēguǒ)的时间由单向免疫扩散法的≥24h缩短到4-5h。4第四页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊经典的免疫沉淀试验通常是在抗原与相应抗体反应的终点判定结果，存在费时(fèishí)、操作繁琐、敏感度低（10～100mg/L）、不能自动化等缺陷。根据沉淀反应时，抗原抗体结合后可使反应系统透光度发生改变，建立了以测定透光度为特征的微量免疫沉淀测定法法，既免疫浊度测定技术。5第五页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊1967年由Richie首次报告，20世纪70年代逐步完善，80年代初期初步应用(yìngyòng)临床常规检查。抗原抗体在液相（特殊的缓冲液）中快速结合，形成抗原抗体复合物，反应液出现浊度。6第六页，共四十八页。免疫(miǎnyì)比浊液相中抗原与抗体的反应结果与两者的浓度比例有关。抗原或抗体显著过量时，都只能生成少量的可溶性免疫复合物，分子极小，不适于免疫比浊法检测。免疫比浊技术要求溶液中抗体要保持中等过量，此时免疫复合物（immunecomplex，IC）仍是可溶性的。在这种情况下，抗原与抗体的反应遵循质量作用定律(dìnglǜ)（Ag+Ab＝Ag.Ab），形成IC的量是抗原或抗体的函数。当抗体固定时，IC的量与抗原的量成正比。7第七页，共四十八页。散射(sǎnshè)比浊、透射比浊光路图NEPHELOMETRICDETECTOR光射散IC平光线透射θ(tòushè)光+散射光(guāngxiàn)LIGHTFILTERREACTIONTURBIDIMETRICDETECTORCUVETTESOURCE8第八页，共四十八页。透射还是(háishi)散射目前，国内开展的各项免疫检验，均求使用国家食品(shípǐn)药品监督管理局（SFDA）准入和批准的仪器和试剂。这样做不仅能使各项检查更加统一，规范，各实验室之间检查结果更具可比性，而且也可避免很多不必要的医疗纠纷。免疫比浊技术中散射比浊法目前均用获国家食品药品监督管理局（SFDA）批准进口的自动化分析仪器和配套的各种检测项目的专用试剂。透射比浊法（生化分析仪）可用国产试剂。——全国临床(línchuánɡ)检验操作规程9第3版第九页，共四十八页。透射还是散射散射比浊透射比浊专用(zhuānyòng)仪器生化分析仪开放试剂(shìjì)专用配套试剂（可用国产试剂）原装进口试剂昂贵a)速率(sùlǜ)法和终点法测定；b)速率法的灵敏度和特异性优于终点法；终点法的稳定性较好；10第十页，共四十八页。透射还是(háishi)散射目前，由于技术的发展，两种比浊法的灵敏度和特异性已接近，而全自动生化仪的自动化程度和精密度要胜于专用散射比浊仪，透射免疫比浊法在临床上的应用日益广泛。生化分析仪通过免疫比浊法技术，架起了现代生化检验和现代免疫技术的桥梁。免疫化学是免疫学技术和生物化学技术的结合。既具有(jùyǒu)免疫学抗原抗体结合的特异性，又具有(jùyǒu)生物化学反应动力学特点。11第十一页，共四十八页。透射(tòushè)免疫比浊可溶性抗原(kàngyuán)与其特异性抗体，在一定缓冲液中形成的复合物，经一段时间聚合后出现浊度，人射光在渗过反应液时，由于溶液内IC粒子对光线的反射和吸收，引起透射光减少，可用吸光度A表示。用已知浓度的标准参考品建立标准曲线，测出待测抗原的含量。透射比浊法主要用于生化分析仪。12第十二页，共四十八页。透射(tòushè)免疫比浊免疫复合物直径为35～lOOnm，这一范围要求近紫外光处入射光发出最大的干扰(最大吸收峰)，选择290～410nm波长测定最佳。由于抗原抗体结合后在...
