诊断学第一页，共五十五页。临床(línchuánɡ)病原学检查山东大学(shāndōnɡdàxué)刘金玲2第二页，共五十五页。临床(línchuánɡ)病原体检查目的临床病原体检查目的:是确定感染的发生和性质(xìngzhì)，在疾病早期提供恰当的治疗方案，并采取有效的预防措施，防止感染传播造成的危害。第三页，共五十五页。各种不同病原体的实验诊断方法遵循(zūnxún)以下基本原则1.正确、规范采集和运送标本。2.直接显微镜查见病原体或检出病原体抗原，借助分子生物学的方法检测病原体核酸，结合病人的病史、症状或体征，快速作出初步诊断。3.初步诊断同时，对病原体进行分离与鉴定。4.检测机体对病原体的免疫产物。5.参与临床(línchuánɡ)选择抗菌药物，指导和监控微生物的治疗方案，避免耐药菌株的产生。第四页，共五十五页。病原学诊断(zhěnduàn)细菌学诊断(zhěnduàn)病毒学诊断真菌学诊断5第五页，共五十五页。致病菌的检验(jiǎnyàn)程序和常用项目形态学检查直接涂片(túpiàn初步诊断)染色镜检分离培养形态特征（常规培养或生化试验特殊培养）血清学试验明药动物实验确物敏血清学诊断诊感断试（凝集试验、沉淀反应、免疫标记技术等）细菌的快速鉴定验(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等）第六页，共五十五页。细菌感染检查(jiǎnchá)检验特点•通过对标本直接显微镜检，病原菌的分离培养鉴定，病原菌的抗原检测，核酸检测和细菌感染后机体免疫应答产物的测定(cèdìng)及药物的测定(cèdìng)及药物敏感性试验，对细菌感染性疾病可作出及时、准确的病原学诊断。7第七页，共五十五页。DiagnosisStrategyforBacterialInfection第八页，共五十五页。革兰染色法（GramStain）由丹麦(dānmài)医生HansChristianGram于1884年创立。1.步骤(bùzh革兰阳性菌òu)(Grampositivebacteria)涂片结晶紫碘液酒精革兰阴性菌媒染脱色(Gramnegativebacteria)染色复红复染9第九页，共五十五页。①直接涂片(túpiàn)染色镜检适用于具有特征性形态和染色性的病原菌,如葡萄球菌、脑膜炎奈瑟菌、抗酸染色(rǎnsè)阳性的结核分枝杆菌等。第十页，共五十五页。②分离(fēnlí)培养大多数细菌的形态与染色并无显著特异性，因此需要(xūyào)分离培养。如肠道杆菌均为G-杆菌，菌落形态亦相同。培养特征：化脓性链球菌---小而透明、溶血环。第十一页，共五十五页。②分离(fēnlí)培养•生化试验：如肠道杆菌进行乳糖发酵试验。•血清(xuèqīng)学试验：已知抗体测抗原或已知抗原测病人血清(xuèqīng)中相应的抗体。如玻片凝集，鉴定菌种和型。•动物试验：测定细菌的毒力、病原菌的分离和鉴定。第十二页，共五十五页。③血清学诊断原理：已知抗体测未知抗原进行病原(zhě菌nduà的n)鉴定或用已知抗原检测患者体液中有无相应(xiāngyīng)特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些传染病的辅助诊断。标本：双份血清标本，恢复期血清抗体效价比急性期升高≥4倍者方有意义。单份血清效价超过一定标准才有诊断意义。种类：凝集试验、沉淀试验、中和试验、补体结合试验。第十三页，共五十五页。常用的血清学诊断(zhěnduàn)方法类型诊断应用举例直接凝集试验伤寒和副伤寒（肥达试验）、立克次体（外斐试验）、钩端螺旋体（显微凝集试验）乳胶凝集试验检测脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等抗体沉淀试验梅毒（VDRL、RPR试验）检测Q热柯克斯体等抗体补体结合试验风湿热（抗O试验）中和试验广泛用于病原体的诊断和流行病学调查ELISA第十四页，共五十五页。玻片凝集(níngjí)试第十五页，共五十五页。试管凝集(níngjí)试验验酶联免疫吸附试验(shìyàn)第十六页，共五十五页。④细菌(xìjūn)的快速鉴定API细菌数值鉴定(jiàndìng)系统第十七页，共五十五页。PCR技术(jìshù)第十八页，共五十五页。姬姆萨染色(rǎnsè)衣原体包涵体HSV病毒(bìngdú)被支原体感染(gǎnrǎn)的精子梅毒螺旋体19第十九页，共五十五页。检测(jiǎncè)程序20第二十页，共五十五页。病毒感染的微生物学(wēishēnɡwùxué)检查法第二十一页，共五十五页。DiagnosisSt...
