实验(shíyàn)目的：1.了解培养基的配制原理2.掌握配制培养基的一般方法和步骤培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质原则：目的明确;营养协调;控制PH、渗透压等条件;经济节约方法：查阅文献;精心设计;试验比较步骤：称量、熔化、调PH、过滤、分装、加塞、包扎、灭菌、冷却、无菌检查第一页，共六十三页。培养基种类:碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水一、按成份的不同划分天然培养基、合成(héchéng)培养基、半合成(héchéng)培养基二、按培养基的物理状态划分固体培养基、液体培养基、半固体培养基三、按培养基用途划分基础培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基第二页，共六十三页。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通(pǔtōng)的细菌基础培养基。其配方如下：牛肉膏3g，蛋白胨10g，Nacl5g，琼脂15～20g，水1000mL，PH7.0～7.2(后调)第三页，共六十三页。高氏1号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下：可溶性淀粉(diànfěn)20g，KNO31g，NaCl0.5g，K2HPO4·3H2O0.5g，MgSO4·7H2O0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，琼脂15～20g，水1000mL，pH7.4～7.6。高氏1号培养基第四页，共六十三页。查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基,其配方如下：NaNO33g,K2HPO41g,KCl0.5g,MgSO4.7H2O0.5g,FeSO40.01g,蔗糖(zhètáng)30g,H2O1000ml,pH自然第五页，共六十三页。用来培养酵母菌,干麦芽粉加4倍水,在50-60℃保温糖化3-4小时，用碘液试验检查至糖化完全为止,调整糖液浓度(nóngdù),煮沸后，过滤，调pH为6.0。第六页，共六十三页。消毒与灭菌消毒：消灭病原菌和有害微生物的营养体灭菌：杀灭一切微生物的营养体，芽胞和孢子。方法：物理的方法：加热、过滤、辐射化学的方法：用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子(lízǐ)，磺胺类药物及抗生素等。第七页，共六十三页。加热法：干热法：火焰灼烧灭菌和热空气灭菌1、火焰灼烧适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等，试管口和瓶口，涂布用玻璃棒。2、热空气(kōngqì)灭菌利用高温干燥空气(kōngqì)（160－170C）加热灭菌1－2h，适用于玻璃器皿和培养皿等。原理加热使蛋白质变性，与水的含量有关，当环境和细胞含水量越大，凝固越快。3、注意事项：1）培养基、橡胶制品、塑料制品不能用此法；2）温度控制在<180°；3）物品不能太挤；4）温度降至70°时才开箱门。第八页，共六十三页。第九页，共六十三页。湿热法：原理：因为(yīnwèi)湿热中菌体吸水，蛋白质容易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低；湿热的蒸气有潜热存在。所以效果比同温度下干热好。高压蒸汽灭菌法：1、设备：高压灭菌锅2、时间长短根据灭菌物品的种类和数量不同有所变化。3、适用于培养基、工作服、橡胶物品等的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌。4、注意事项：1）冷空气彻底排除；2）加水；3）压力降为“0”时方可打开。第十页，共六十三页。在使用高压蒸气灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全(wánquán)极为重要，因为空气的膨胀压大于水蒸气的膨胀压，所以，当水蒸气中含有空气时，在同一压力下，含空气蒸气的温度低于饱和蒸气的温度。灭菌锅内留有不同分量空气时，压力与温度的关系见表2第十一页，共六十三页。第十二页，共六十三页。常压蒸汽灭菌：对于不宜用高压蒸汽灭菌的培养基如明胶培养基、牛乳培养基，含糖培养基等可采用此法。彻底灭菌则采用间歇灭菌方法。煮沸灭菌法：适用(shìyòng)注射器和解剖器皿，时间10－15min，超高温杀菌135-150°C和2-8s对牛乳和其它液态食品灭菌。优点：保持食品价值和营养成分。第十三页，共六十三页。过滤除菌：原理：介质在有压力时阻隔微生物。适用范围：许多材料如血清、抗生素及糖溶液采用此法。设备：蔡氏过滤器，滤膜过滤器。优缺点：不破坏培养基成分，只适用少量滤液。注意事项：1、压力适当；2、无菌条件下进行；3、防止(fángzhǐ)渗透现象。第十四页，共六十三页。辐射灭菌：原理：紫外线波长在200－300nm，具有杀菌作用，以265-266杀菌力强。此段波长易被细胞中核酸吸收；可产...
