病原(bìngyuán)性球菌与肠道杆菌一、实验目的1.掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。2.熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。3.了解三种葡萄球菌产生的色素。4.了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性。5.了解大肠(dàcháng)埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SS平板上菌落特点。第一页，共二十一页。1.示教观察葡萄球菌、链球菌的形态2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵3.化脓性球菌的鉴定⑴三种葡萄球菌的色素观察⑵甲、乙型链球菌的溶血现象观察4.甘露醇发酵实验5.血浆(xuèjiāng)凝固酶实验第二页，共二十一页。1.葡萄球菌(pútáoqiújūn)、链球菌的培示教养物表1普通琼脂平板血平板菌落形状色素溶血性金葡圆形凸起光滑中等大小(dàxiǎo)金黄色+柠葡-同上柠檬色白葡-同上白色第三页，共二十一页。第四页，共二十一页。葡萄球菌(pútáoqiújūn)分类按照(ànzhào)色素不同表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌金黄色葡萄球菌(pút（白色）（柠檬色）（金黄色）第五页，共二十一页。性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色血浆凝固酶-甘露醇+--溶血性+----SPAβ溶血-耐热核酸酶-致病性+-+弱强无第六页，共二十一页。第七页，共二十一页。表2巧克力血平板(píngbǎn)脑膜炎双球菌菌落透明似露滴状表3血平板甲型链球菌针尖小菌落(jūnluò)、草绿色狭窄溶血环(α溶血即不完全溶血）乙型链球菌针尖小菌落、透明宽大溶血环第八页，共二十一页。α溶血(rónɡxuè)β溶血(狭窄草绿色溶血环)（宽大透明溶血环）草绿色链球菌溶血性链球菌不溶血(rónɡxuè)链球菌多为条件(tiáojiàn)致病菌致病力强无致病性第九页，共二十一页。乙型溶血性链球菌•溶血(rónɡxuè)环第十页，共二十一页。大肠杆菌(dàchánɡɡǎnjūn)痢疾杆菌第十二页，共二十一页。第十三页，共二十一页。Salmonella-ShigellaMediun主要成分(chéng分解(fēnjiě)产酸PH指示剂变红色fèn)乳糖大肠杆菌等基础营养乳糖指示红色大菌落剂不分解(fēn抑jiě)制乳糖剂无色半透明小菌落无明显变化志贺菌等第十五页，共二十一页。分别取金葡、白葡菌落接种(jiēzhòng)到甘露醇发酵培养基中，置37℃培养箱，培养24h。金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸。第十七页，共二十一页。血浆凝固(nínggù)酶试验--玻片法（操作(cāozuò)，1人/组）原理(yuánlǐ)：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）方法：12兔血浆兔血浆++金葡白葡凝集颗粒（+）不凝集（-）第十八页，共二十一页。4、血浆(xuèjiāng)凝固酶试验（试管法）示教冻性(yángxìng)凝金葡菌白葡菌性不样凝固凝集++集状（为为兔血浆兔血浆阴胶阳37℃30′水浴(shuǐyù)观察第十九页，共二十一页。凝固(nínggù)酶实验（试管法）第二十页，共二十一页。内容(nèiróng)总结病原性球菌与肠道杆菌。5.了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SS平板上菌落特点。2.观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵(fājiào)。大肠杆菌（非致病菌）在SS培养基上可形成相对较大，不透明，红色的菌落。痢疾杆菌在SS培养基上形成的菌落与伤寒杆菌菌落相似。SS平板：为强选择性培养基，内含胆盐、枸橼酸钠和煌绿，可抑制大肠杆菌和非肠道杆菌的生长。双糖铁培养基含葡萄糖、乳糖、硫酸亚铁第二十一页，共二十一页。
