动物(dòngwù)布氏杆菌病血清学诊断第一页，共三十页。(bùlǔshìjūn)布鲁氏菌病1887年英国军医Bruce首先从死于“马耳他热”的英国士兵的脾脏中分离出羊种布氏菌。布鲁氏菌病（Brucellosis）是由布鲁氏菌属（Brucella）的细菌侵入机体，引起传染－变态反应(biàntàifǎnyìng)性的人畜共患传染病。布鲁氏菌病简称布病。布鲁氏菌简称为布氏菌第二页，共三十页。布鲁氏菌(bùlǔshìjūn)病检验方法：依据标准GB/T18646-2002适用范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。本规定的虎红平板凝集试验、乳牛(rǔniú)全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛(rǔniú)场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验；试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布病感染的家畜。本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副睾种布病感染家畜的检疫。第三页，共三十页。(fēnlí)布氏杆菌分离培养脂(qióngzhī脂(qióngzhī布菌培养：琼)培养基、血琼)培养基，厌氧培养。布菌鉴定：菌落形态观察、涂片、染色、镜检布氏菌，诊断血清凝集试验。第四页，共三十页。试管(shìguǎn)增菌布氏菌特异(tèyì)的油滴样菌落第五页，共三十页。图1琼脂(qióngzhī)布鲁氏图2血平皿布氏菌菌落菌菌落(jūnluò)第六页，共三十页。布氏菌革兰染色(rǎnsè)镜检第七页，共三十页。1布病虎红平板凝集(níngjí)布病实验血清学检验(jiǎnyàn)2布病试管(shìguǎn)凝集实验第八页，共三十页。(píngbǎn)布病虎红平板凝集实验材料准备：抗原、标准阳性血清、阴性血清由青岛易邦生物科技公司提供，按说明用。受检血清应新鲜，无明显(míngxiǎn)蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。准备一块洁净玻璃板，画成若干个4厘米小格或虎红平板凝集试验玻璃板、陶瓷板。用移液器，适于滴加0.03ml（即300μl）液体。原理：利用酸性带色的抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性，主要检查血清中的IgG类抗体。第九页，共三十页。操作方法在实验薄片上标记好位置滴加1图0.03ml的抗原。图1.在每一个(yīɡè)标记好的布病抗原上滴加0.03ml的待检血清，用移液器吸头搅混均匀。每次试验应设阴性、阳性血清对照第十页，共三十页。结果判定(jiēguǒ)判定结果前最好将抗原(kàngyuán)与血清混合物摇动几下.如图3.在阴性、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。被检血清在4分钟内出现肉眼可见的凝集现象者判为阳性（+），无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性（—）。每份被检血清在规定时间内出现凝集反应者判为阳性，不出现凝集为阴性反应。第十一页，共三十页。阴性阳性第十二页，共三十页。注意事项本抗原(kàngyuán)适合于大数量田间检疫和筛选诊断试验用。本试验出现阳性反应的动物，需经试管凝集试验或其它辅助试验方可定性。本抗原使用前应充分摇匀，方可使用。凡本抗原出现污染或摇不散的凝集块者不得使用。第十三页，共三十页。布鲁氏菌病试管凝集试验(níngjí)(ròuyǎn)可见的凝集反应，也就是用已知抗原查未知抗体。原理：布氏菌侵入机体后，就会刺激机体产生特异性抗体，这种抗体可与相应的布氏菌抗原发生特异性结合，在电解质的作用下，就会形成肉眼第十四页，共三十页。材料准备(cáiliào)稀释液：0.5%石碳酸生理盐水。检验羊血清时用含0.5%石碳酸的10%盐溶液，如果血清稀释用含0.5%石碳酸的10%盐溶液，抗原的稀释亦用含0.5%石碳酸的10%盐溶液。1.2抗原、阳性血清、阴性血清由指标单位提供，按说明书使用。1.3凝集试验管（三分(sānfēn)管）、试管架、吸管及温箱等。三分是英制管道直径长度的叫法，换算成毫米为9.525mm，这里指内径约为10mm试管第十五页，共三十页。操作方法1.按常规方法采血分离血清。2.运送和保存血清样品时防止冻结和受热，以免影响凝集价。若3d内不能送检，按每9ml血清加1ml5%石碳酸生理盐水防腐，也可冷藏方法运送血清。3.被检血清的稀释以羊和猪为例，每份血清用4支凝集试管。3.1第1管标记检验编码后加1.15mL稀释液。3.2第2～4管各加入0.5mL稀释液。...
