第一页，共二十八页。基础知识•（一）被子植物的花粉发育•被子植物的花的结构是怎样的？•(duìyìng)观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应的时期吗？又有何特点？第二页，共二十八页。被子植物(bèizǐ-zhíwù)的花粉发育雌蕊(círuǐ)：花丝(huāsī)花药：囊状结构，内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期第三页，共二十八页。注意：①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。③两个精子和一个营养核的基因型相同。④1花粉母细胞减分4个小孢子有分4个花粉管细胞核4个生殖细胞核有分第四页，共二十八页。8个精•（二）产生花粉植株(zhízhū)的两种途径•有哪两种途径？原因是什么？花药中胚状体丛芽生根移栽的花粉愈伤组织丛芽花药中的花粉花药培养产生花粉植株的两种途径第五页，共二十八页。•（三）影响花药培养的因素•1、材料的选择•不同植物（花期早期－初花期）•同一植物的不同生理状况(zǎoqī)（单核居中期与靠边期之间）•合适的花粉发育期•此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等•2、培养基的组成第六页，共二十八页。材料的选择：花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬，即月季的初花期。选择合适的花粉发育时期也是提高(tígāo)诱导成功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。第七页，共二十八页。•(cáiliào)为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？•答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。第八页，共二十八页。实验(shíyàn)操作•（一）材料的选取•染色镜检•（二）材料的消毒•酒精、氯化汞、次氯酸钙•（三）接种和培养结果(jiēguǒ)分析与评价第九页，共二十八页。（一）材料(cáiliào)的选取选择花药时，一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有醋酸(cùsuān)洋红法。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。第十页，共二十八页。（二）材料(cáiliào)的消毒1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒2、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液）5、无菌水冲洗3~5次用于培养花药，实际上多数(duōshù)未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。第十一页，共二十八页。（三）接种(jiēzhòng)和培养灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量(jǐnliàng)不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。第十二页，共二十八页。如果花药开裂释放出胚状体，则一个(yīɡè)花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。（主要原因是营养核和生殖核融合造成的。）第十三页，共二十八页。植物(zhíwù)组织培养技术与花药培养技术的异同点项目相同点不同点植物组织培养离体的植物组织经外植体为体细胞，技术脱分化形成愈伤组染色体数无需加花药培养技术织，再分化成丛芽，倍。诱导出根，然后进取...
