第12章花药培养和花粉(huāfěn)培养安徽大学《细胞工程》精品课程陈勤第一页，共四十五页。主要(zhǔyào)内容花粉和花药培养技术(jìshù)花粉和花药培养应用安徽大学《细胞工程》精品课程陈勤第二页，共四十五页。教学目的(mùdì)与要求(1)掌握花药培养和花粉培养的区别(2)了解花药最佳(zuìjiā)接种时期(3)掌握花药培养的大致过程(4)掌握花粉发育的四种途径(5)掌握花粉培养的大致过程第三页，共四十五页。胚珠(pēizhū)第四页，共四十五页。第五页，共四十五页。花的结构(jiégòu)第六页，共四十五页。第七页，共四十五页。一、概述花药是花的雄性器官，花药培养属器官培养；花粉是单倍体细胞，花粉培养与单细胞培养相似花药和花粉都可以在培养过程中诱导单倍体细胞系和单倍体植株。单倍体植株经过染色体加倍就成为纯合二倍体植株，这样可缩短(suōduǎn)育种周期，获得纯系。花培已成为植物育种的一种重要手段。第八页，共四十五页。一、概述植物(zhíwù)的花粉是花粉母细胞经减数分裂形成的，其染色体数目只有体细胞的一半，叫做单倍体细胞(haploidcell)。花粉和花药的培养(pollenandantherculture)是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精而发生细胞分裂，由单个花粉粒发育成完整植株的技术。用离体培养花药的方法使花粉发育成一个完整的植株，叫做单倍体植物(haplobiont)。安徽大学《细胞工程》精品课程陈勤第九页，共四十五页。花药培养是将花粉发育至一定阶段(jiēduàn)的花药接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。第十页，共四十五页。花粉(huāfěn)和花药培养的研究意义单倍体植株(zhízhū)育种诱导(yòudǎo)形成单倍体，快速获得纯系，缩短育种周期有利于筛选隐性突变体，提高选择效率获得无病毒个体有利于隐性基因控制性状的选择快速获得自交系的超雄株第十一页，共四十五页。花药培养简史1964年：印度学者古哈(Guha)和马斯瓦瑞（Maheswari）将南洋金花花药培养发育成胚1967年：包金(Bourgin)和尼奇(Nitsch)花药培养获得烟草植株1973年：我国首次(shǒucì)报道了小麦花药培养获得再生植株目前：许多农作物及经济植物通过花粉培养都能诱导成植株第十二页，共四十五页。花药培养与单倍体育种(yùzhǒng)花药培养的主要目的，是培育花粉粒的单倍体植株，并使单倍体加倍，作为育种材料的来源。利用杂种花药离体培养获得的再生植株，由不同基因型的配子(pèizǐ)发育而来，具有丰富的变异类型，选择出有利的变异类型，经过经济性状鉴定后，选出优良者直接用于生产或配制杂交组合，获得优良杂交种子。构建永久性分离群体－双单倍体系（Doubledhaploid)，用于基因定位。双单倍体：是指单倍体细胞（花粉或卵细胞）经过人工或自发加倍后得到双单倍体细胞，细胞经诱导分化可发育为单双倍体植株。第十三页，共四十五页。大大缩短育种(yùzhǒng)周期通(tōngguò)bèi)单倍过多（植体次自如株的交秋再品或水通系近仙过交素某获染色处种得体的理）手段几从使乎数是同而染质使色结植体合物组恢加复倍正常(jiā第十四页，共四十五页。二、花药培养技术(jìshù)确定取材时间选择大致处于所需要时期的花蕾。由于花粉发育时期和植株的某些外部形态特征之间的大致相关性，因此利用这些(zhèxiē)外部标志，选择符合条件的花蕾，经镜检确定花粉发育的准确时期。在水稻中，以单核靠边期的花粉对诱导单倍体植株较为适宜，在外部形态上可根据叶枕距为5～15cm，颖片（禾本科植物小穗基部，由苞片转变而成）淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2这些条件来判断。第十五页，共四十五页。稻水(shuǐdào)花药培养旗叶鞘用70％酒精(jiǔjīng)擦洗一遍剥去旗叶鞘(yèqiào)，取出稻穗左手持穗，右手用镊子取出花药，无菌培养皿中70％酒精，洗2遍用接种环接种到培养基上培养5天后，花药变黑褐色，20天花药裂开，长出淡黄色的花粉愈伤组织，先形成芽，后长出根，形成幼苗。第十六页，共四十五页。注意事项选取主穗（一级侧枝）的花蕾，因为一级侧枝的花蕾发育(fāyù)良好，数量大，发育(fāyù)同步。操作过程中不应使花药受到损伤，若...
